Kako nas zavaravaju s PCR dijagnostikom za HIV. PCR istraživanje - moderna dijagnostika HIV-a, AIDS PCR dijagnostika HIV infekcije

Da nas je HIV/AIDS zavaravao 30 godina jest medicinska činjenica, što već odavno ne treba nikakav dokaz. Ne želim nikoga uvrijediti, ali istina je da je u ovom trenutku, imajući pred sobom sve dostupne informacije o alternativnom stajalištu, odnosno koje iznose HIV disidenti, jednostavno nemoguće nastaviti i naivno vjeruju u umjetno stvorenu i uz pomoć cinične i lažljive propagande nametnutu teoriju HIV/AIDS-a.

Ako ste izrazili svoje čuđenje zbog činjenice da dijagnostički testovi za HIV ne otkrivaju sam virus, već samo antitijela na njega, a to se ne odnosi samo na enzimski imunoanalizu, već i na imunobloting, koji se smatra točnijim, onda vjerojatno ste čuli uvjeravanja liječnika ili nekih upućenih ljudi da postoji metoda lančane reakcije polimerazom koja nema veze s antitijelima, već direktno otkriva sam virus.
Jeste li čuli za PCR dijagnostičku metodu, a posebno za HIV infekciju? Zasigurno. Jeste li pokušali malo proniknuti u to i shvatiti? Ne? Dakle, jasno je da nas se vara? Fino. Ali sada ću to jasno pokazati, na prstima...

Da, stvarno se bezočno i cinično varamo kada nas uvjeravaju da se PCR testom na HIV utvrđuje prisutnost samog virusa ili njegova koncentracija u krvi, odnosno viral load. I odmah ću reći da se u tom pogledu PCR metoda ne samo ne razlikuje od ELISA-e i IB-a, već se može reći da se izravno temelji na potpuno istom principu.
Što to znači? Podsjećam da se dijagnostički HIV testovi ELISA i Immunoblot temelje na reakciji antitijela u testnom uzorku s antigenima virusa koji se nalaze u samom testu. Što je u testnim sustavima kao ti proteini HIV-a - samo Bog zna, a vjerojatno ne sve. Sukladno tome, potpuno je nejasno koja protutijela reagiraju s tim navodnim HIV proteinima, što rezultira popisom od 62 stavke bolesti i stanja koja uzrokuju lažno pozitivnu reakciju.

Što je osnova metode lančane reakcije polimerazom i kako se njome dijagnosticiraju zarazne bolesti? U slučaju hepatitisa i HIV-a ispituje se krv bolesnika. Za utvrđivanje prisutnosti određenog patogena u uzorku krvi koji se proučava, za PCR testiranje koristi se primer, odnosno fragment DNK samog patogena, komplementaran specifičnom dijelu njegove DNK, odnosno, u biti, početnica je pričvršćena na dio DNA na isti način kao što su dijelovi međusobno povezani dvostruka spirala DNA.
shvaćate li Uzima vam se krv, zatim joj se dodaje nešto što je navodno nedvojbeno jedinstveni dio genoma virusa HIV-a, dodaju se drugi potrebni sastojci, zatim se sve skupa zagrijava i hladi trideset puta, i rezultat je voila! ti si HIV pozitivan! vaše virusno opterećenje je 3 milijuna! odmah počni s terapijom!

Ali čekaj. Zar ne vidite kako ste bili prevareni od samog početka?
Uvjerili ste se da PCR metoda otkriva sam virus. Ali ovo je apsolutna laž! PCR metoda se u tom smislu ne razlikuje od ELISA i IB! Kao što se nepoznate stvari koriste u sustavima testiranja pod krinkom antigena HIV-a, tako se u PCR testovima, pod krinkom početnica koje se izdaju kao dio DNK samog HIV-a, na isti način koristi potpuno nepoznata tvar. Razumijete da ako HIV ne postoji, onda ne može biti govora ni o kakvoj HIV DNK, ili HIV RNK, ili antitijelima na HIV, posebno majčinim antitijelima, s kojima nas zavaravaju govoreći nam da su sva djeca HIV pozitivnih majki , a nestaju same od sebe u drugoj godini života...

Kao ovo.
- PCR metoda otkriva sam virus HIV-a, tu nema greške ni dvojbe! A ova najpreciznija metoda pokazuje viral load, što je vrlo važno za praćenje dinamike bolesti i njezino liječenje!
- Pa, dobro... Govorite o samom virusu? Što se koristi kao temeljni premaz? Isti virus? Isti onaj koji su Montagnier i Gallo otkrili prije 30 godina? Jesu li ga stvarno pronašli? Stvarno očišćeno? Jeste li stvarno slikali? Je li doista dokazano da koristi T-limfocite za replikaciju/razmnožavanje, uslijed čega se njihov ukupni broj iscrpljuje i dolazi do opasne imunodeficijencije? Je li sve ovo istina?

A u biti, PCR metoda u AIDS-u koristi se ne toliko zahvaljujući svom izumitelju Karyu Mullisu (dapače, čak suprotno njegovom mišljenju!), koliko zahvaljujući Montagni i Gallou, koji su izvukli HIV iz ničega, i čiji su DNA početnici koriste se u PCR dijagnostici HIV-a...

Pa evo ga. Ako vam je na temelju rezultata PCR testa rečeno da ste HIV pozitivni i da imate visok virusni teret ili je riječ o vašem djetetu, ne brinite ni trenutka! bezočno ste prevareni! Izumitelj metode lančane reakcije polimerazom, mikrobiolog Kary Mullis, HIV disident, kategorički je protiv upotrebe PCR-a u dijagnostici HIV-a, jer dobro razumije da je u slučaju nepostojećeg virusa HIV-a to jednostavno čista cinična prevara...

Još jedan trenutak. Jeste li čuli za nemjerljivo virusno opterećenje? Činjenica je da ne dobiju sve HIV pozitivne osobe prilikom testiranja količine virusa u krvi određeni rezultat koji se, ovisno o vrijednosti, smatra niskim ili visokim viral loadom. Da je takvih ljudi malo, o njima se uopće ne bi pričalo. No, činjenica je da ih naizgled ima puno, pa se zato kod HIV infekcije govori o nemjerljivoj količini virusa. Neću spominjati PR terapiju koja navodno svodi VL na nemjerljivo. Ne, činjenica je da se bez ikakve terapije kod mnogih ljudi ne otkrije. Nikada.
Odnosno, pacijentu se dijagnosticira HIV infekcija, ali uz pomoć poznatog superosjetljivog kozmičkog točna metoda PCR dijagnostika ne može otkriti virus HIV-a u njegovom tijelu. Kako to?

I onda nam se kaže da je metoda, naravno, jedinstvena, ali suvremena tehnička sredstva još uvijek nameću ograničenja, a većinaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaavremena ne može se otkriti PCR dijagnostikom.

To jest, pacijent nedvojbeno ima HIV. Virus je neizlječiv, neuništiv, lukav, podmukao, zlonamjeran, iznimno pametan i inventivan. Čak ni super-čarobna PCR metoda ne može otkriti gdje se lukavi virus skriva od znanstvenika i liječnika.
Ispada da nam, s jedne strane, govore kako je PCR metoda divna i vrlo precizna, može pogoditi cijelog slona, ​​pa čak i kita iz jedne molekule - a s druge strane, spuštenih očiju mrmljaju nejasno o nemjerljivoj količini virusa u tisućama pacijenata koji već desetljećima žive s dijagnozom HIV infekcije i ne uzimaju antiretrovirusno liječenje.

Tako to ide. Glupaju nas kako hoće. Ne budite neustrašivi idioti. Ne vjerujte liječniku ili znanstveniku na riječ. Reći će vam tri puta sedam puta o kozmičkoj točnosti PCR testova, ali samo jedna primjedba o HIV početnicima korištenim u ovom slučaju smjesta razbija cijelu veličanstvenu sliku u paramparčad. Jer zabave radi, možemo reći da kao što je Gallo patentirao prve HIV testove kada je otkrio lažni HIV virus, na isti način je mogao patentirati HIV primere za PCR dijagnostiku HIV infekcije, jer su početnici u biti ista stvar, HIV antigeni su neke specifične biološke tvari svojstvene samo ovom virusu (fragmenti genoma ili specifični proteini)...

HIV PCR jedna je od najinformativnijih metoda molekularne genetske dijagnoze. Ova metoda pomaže identificirati različite vrste zaraznih bolesti i bolesti kod pacijenta koje su naslijeđene. Ista dijagnostička metoda primjenjiva je u slučaju testiranja biomaterijala na prisutnost HIV-a, ozbiljne bolesti koja se razvija tijekom života pacijenta. S medicinska pomoć PCR je bio među preporučenim testovima koji se rade uz naplatu u slučajevima sumnje na virus humane imunodeficijencije. Međutim, pouzdanost studije opravdana je samo u 80 od 100 slučajeva.

PCR dijagnostika za HIV označava lančanu reakciju polimerazom. Za ovu vrstu istraživanja koriste Različite vrste biološki materijali. Među njima je krv, osim toga, može se koristiti sekret iz vagine pacijenta ili sjemena tekućina kod muškaraca.

Pažnja! Slina se ne koristi za PCR u dijagnostici HIV-a. Ovaj pristup se smatra neučinkovitim, budući da su antitijela na HIV u ovom materijalu minimalna koncentracija. Isto vrijedi i za urin, znoj i suze.

Indikacija za opisanu studiju je dvostruko pozitivna ELISA (imunoenzimski test). O alternativnim zadacima bit će riječi kasnije.

Pojedinosti o suštini analize

PCR test za HIV temelji se na sposobnosti nukleinske kiseline da se samostalno razmnožava. Žive stanice sastoje se od proteina i tih istih kiselina, drugim riječima, RNA i DNA. Molekule djeluju kao čuvari genetskog koda.
Pri niskoj koncentraciji virusnih čestica (HIV) u biomaterijalu, uzorak ne uključuje cijele lance DNA (dezoksiribonukleinska kiselina), već samo njihove komponente, nazvane nukleotidi. Analiza vam omogućuje otkrivanje čak i manjih ostataka stanica virusa. Upravo ta činjenica objašnjava sposobnost PCR-a da pokaže rezultate na rani stadiji– nekoliko tjedana nakon infekcije HIV-om.

Najbolji rezultati lančane reakcije polimerazom mogu se očekivati ​​pri ispitivanju venske krvi. Uzorak se digestira pomoću opreme. Frakcije se zatim podvrgavaju enzimskoj obradi. Reaktivne tvari spajaju se s česticama virusne DNA kako bi je duplicirale. Broj takvih elemenata raste po lančanom principu sve dok njihova prisutnost (a ne antitijela) u krvi bolesnika ne postane vidljiva laboratorijskim tehničarima. Nijedan od njih ne radi na potpuno istom principu. postojeće metode dijagnostika

Komponente reakcije

Koristeći PCR metodu, možete unaprijed saznati o razvoju virusa u tijelu. Zašto se to ne može nazvati popularnim u području besplatne medicine i učiniti posvuda? Činjenica je da je takav HIV test vrlo skup i zahtijeva sljedeće komponente:

• matriks deoksiribonukleinske kiseline uključujući segment DNA namijenjen za pojačavanje;
• dva primera (za svaki segment lanca);
• kemijski aktivna komponenta polimeraze za ubrzavanje polimerizacije virusnih čestica;
• deoksiribonukleozid trifosfati;
• čestice dvovalentnog magnezija (nabijene);
• posebno rješenje za stvaranje povoljni uvjeti, osiguravajući odgovarajuću razinu kiselosti, koncentraciju soli i broj čestica magnezija u tekućini.

Pažnja! Kako bi se uzorak zaštitio od pregrijavanja, u materijal se dodaje mala količina vazelina koji sadrži masti i, sukladno tome, visoka temperatura ključanje.

Relativno visoka točnost analize objašnjava se njegovom povećanom osjetljivošću, koja potiče reakciju na antitijela na druge viruse.

Prednosti i nedostaci PCR tehnike za HIV

Kako bismo objektivno ocijenili metodu, u tablici ispod prikazujemo niz prednosti i nedostataka studije:

Očito, postoji više prednosti tehnike. Procjenjujemo li vrstu dijagnoze sa stajališta produktivnosti daljnjeg liječenja i mogućnosti produljenja života bolesnika, PCR je najsigurniji put do uspjeha.

Značajke analize

Glavna značajka opisane analize je njezina sposobnost ranog dijagnosticiranja HIV-a, što druge metode istraživanja nisu u stanju. Koliko dana nakon sumnje na infekciju mogu dati krv za PCR? Obično je to vremensko razdoblje 10-14 dana. Tijekom sljedeća 24 sata pacijent dobiva rezultat. Moguća odstupanja u rokovima objašnjavaju se individualnim uvjetima rada dijagnostičkih centara i poliklinika.

Svrha studije

PCR se uglavnom provodi za otkrivanje HIV-a (sindrom humane imunodeficijencije). Međutim, test se također može poduzeti ako sumnjate na razvoj spolno prenosivih bolesti. Ista metoda je primjenjiva u slučaju dijagnosticiranja nasljednih bolesti.

PDR dijagnostika: razlozi za provođenje

Kada trebate donirati krv za PCR? U većini slučajeva biološki materijal se donira kada se virus humane imunodeficijencije prilagodio stanju organizma, potaknuo stvaranje antitijela i izazvao prve simptome HIV-a. Međutim, to je opravdano samo ako je prošlo dovoljno vremena nakon infekcije i zahtijeva ELISA.

Potreba za PCR-om javlja se na inicijativu pacijenta koji želi pravovremeno dijagnosticirati bolest (ako postoji). Razlog tome može biti: nezaštićeni spolni odnos, kontakt s biološkim materijalom zaražene osobe, nedavna transfuzija krvi itd.

Kome je propisan PCR?

Određivanje HIV infekcije pomoću PCR-a, po preporuci specijalista, provodi se u sljedećim slučajevima:

• preliminarna dijagnoza. PCR točno potvrđuje ili opovrgava ELISA rezultat;
• imunobloting je potvrdio dijagnozu. Imunološki bloting je dodatni način proučavanja AIDS-a . Obje metode se koriste zajedno, što eliminira mogućnost postavljanja pogrešne dijagnoze;
• s potvrđenim HIV statusom pomoću PCR-a prati se učinak odabranog tretmana;
• za analizu krvi darivatelja za prisutnost antitijela na HIV;
• za određivanje HIV statusa novorođenčeta kada je majka pozitivna. PCR u prvim danima života omogućuje određivanje intrauterine infekcije ili infekcije djeteta tijekom prolaska kroz rodni kanal. Test se provodi 2-3 tjedna nakon poroda.

Koliko dugo traje PCR test i gdje se može obaviti?

PCR analiza HIV-a provodi se u posebnom laboratoriju. Sam test i tumačenje rezultata ne zahtijevaju puno vremena: mjesec ili čak tjedan dana. Vađenje krvi traje do 6 minuta. U normalnom slučaju stručnjaku neće trebati više od jednog dana da postavi dijagnozu i donese zaključak. Prvih 8 sati provodi se proučavanje krvi, preostalo vrijeme provodi se na registraciji. Rezultat se može uzeti već sljedeći dan nakon uzimanja uzorka. Trajanje ekspresnog testiranja je 2 sata.

Pažnja! Polica obveznog zdravstvenog osiguranja omogućuje besplatno polaganje testa u Vladina agencija zdravstvene zaštite.

Gotovo svaki komercijalni laboratorij sposoban je provoditi istraživanja, i to na anonimnoj osnovi. Osobi se dodjeljuje poseban broj s kojim se zatim povezuju rezultati. Ove informacije su postavljene na web stranicu ustanove na adresi Osobni prostor korisnik.

Koliko košta PCR test?

Ova metoda provođenja istraživanja je prilično skupa. To je zbog činjenice da se PCR mora provoditi na najnovijoj medicinskoj opremi; manipulacija zahtijeva dovoljno znanja stručnjaka.

Goruće pitanje je: koliko košta da osoba napravi PCR test na HIV? To će zahtijevati oko 56-60 dolara.

Provođenje analize

PCR testiranje na HIV uključuje:

• uzimanje krvi za istraživanje;
• dodatno prikupljanje sperme od muškarca i genitalnog sekreta od žene.

Pažnja! Kao rezultat toga, test omogućuje liječnicima određivanje visokog virusnog opterećenja kako bi pratili stanje pacijenta.

Druge značajke ovog HIV testa koje treba uzeti u obzir:

• nekoliko dana prije testa, pacijent treba smanjiti količinu masne hrane u prehrani;
• Krv se vadi natašte;
• Razdvojenim biološkim materijalima u posebnom reaktoru dodaju se enzimi koji sintetiziraju razne infekcije;
• analiza se provodi u nekoliko faza, budući da se podjela molekula odvija u aritmetičkoj progresiji. Poseban program uspoređuje veliki broj staničnih struktura za otkrivanje HIV-a.

Precizne dijagnostičke metode, koje uključuju PCR, skupe su, ali mogu otkriti HIV u ranim fazama. U liječenju takvih patologija najvažnija je pravilna i pravovremena dijagnoza, koja može poboljšati kvalitetu i trajanje života osobe.

Opis

Lančanu reakciju polimerazom (PCR) izumio je 1983. američki biokemičar Carey B. Mullis. Za ovo otkriće 1993. godine dobio je Nobelovu nagradu.

Danas su područja primjene PCR-a: moderna metoda molekularne biologije iznimno su široki. PCR dijagnostika zauzima posebno mjesto u medicinska praksa. A razlog za to je vrlo jednostavan: lančana reakcija polimeraze čini nemoguće mogućim.

PCR dijagnostika često se slikovito opisuje kao metoda kojom možete pronaći iglu u plastu sijena i od tih igala izgraditi plast sijena. "Igla" je maleni komadić genetskog materijala stanice (DNK ili RNK).

Stoga je otkriće ove metode jedan od najznačajnijih događaja u području molekularne biologije posljednjih desetljeća. Razvoj PCR metode omogućio je dizanje medicinske dijagnostike općenito na kvalitativno novu razinu.

Osnove PCR-a

Osnova metode je opetovano selektivno kopiranje (amplifikacija) određenog dijela DNA kako bi se dobila tolika količina genetskog materijala koja će biti dovoljna za vizualnu detekciju. U ovom slučaju, samo se određeni dio DNK kopira (amplificira) mnogo puta, pod uvjetom da je prisutan u biomaterijalu koji se proučava.

Osim toga, istraživanje, osim što jednostavno povećava broj kopija isječaka DNK, omogućuje i druge manipulacije genetskim materijalom. Stoga se metoda široko koristi u znanstvenim istraživanjima, biološkoj i medicinskoj praksi: u dijagnostici zaraznih i nasljednih bolesti, u identifikaciji mutacija, genotipizaciji, utvrđivanju očinstva, osobnoj identifikaciji itd.

PCR u dijagnostici zaraznih bolesti

Danas je PCR dijagnostika infekcija jedna od najtočnijih, najosjetljivijih i najučinkovitijih kliničkih laboratorijske metode. Štoviše, raspon detektiranih uzročnika praktički je neograničen - razvio bi se test sustav za PCR analizu željenog uzročnika.

Zbog svoje visoke osjetljivosti, PCR vam omogućuje prepoznavanje patogena čak i uz njegov minimalni sadržaj (to jest, samo nekoliko molekula njegove DNA prisutno je u biomaterijalu koji se proučava).

PCR detektira uzročnike zaraznih bolesti kada se to ne može učiniti drugim metodama (imunološkim, kulturalnim, mikroskopskim). Stoga je za brojne infektivne agense metoda lančane reakcije polimerazom postala "zlatni standard", provjerena je vremenom i klinički ispitana. U suvremenoj laboratorijskoj dijagnostici zaraznih bolesti PCR je najosjetljivija i najspecifičnija metoda za izravnu detekciju uzročnika. To omogućuje ne samo utvrđivanje etiologije bolesti, već i praćenje tijeka zaraznog procesa i procjenu učinkovitosti liječenja.

Testiranje na SPI metodom PCR posebno je relevantno za asimptomatske infektivne procese uzrokovane bezuvjetno patogenim mikroorganizmima (klamidija, kvalitativno određivanje DNA; mikoplazma, kvalitativno određivanje DNA; uzročnik gonoreje, kvalitativno određivanje DNA; uzročnik trihomonoze, kvalitativno određivanje DNA). Na primjer, kod kronične gonoreje kod žena, čak i bakteriološkom metodom, često nije moguće identificirati gonokok, unatoč postojećim simptomima kroničnog upalnog procesa u cerviksu ili uretri.

Suvremena PCR dijagnostika omogućuje ne samo identifikaciju genetskog materijala infektivnih agenasa, već i određivanje njihove koncentracije DNA/RNA (format kvantitativnog istraživanja). Utvrđivanje broja uzročnika važno je pri donošenju odluke o liječenju, posebice ako se utvrde oportunistički mikroorganizmi (Mycoplasma, kvantitativno određivanje DNA; Tipizacija ureaplasma, kvantitativno određivanje DNA).

Jedan od glavnih smjerova u razvoju PCR metode je "Multiprime" format razvijen u CMD-u, koji omogućuje otkrivanje nekoliko patogena u jednoj epruveti (i jednoj reakciji).

• Uzročnici infekcija koje prenose iksodidni krpelji

PCR dijagnostika hepatitisa

Trenutno je poznato najmanje 5 virusa čija je sposobnost da uzrokuju oštećenje jetre dokazana. To su uzročnici hepatitisa A, B, C, D, E. U rijetkim slučajevima hepatitis mogu uzrokovati virusi Epstein-Barr i herpes simplex. Sposobnost uzročnika kao što su TT i virusi hepatitisa G da inficiraju jetru danas nije svatko prepoznao. Svi ti virusi pripadaju različitim obiteljima, imaju različita biološka svojstva i, sukladno tome, taktika liječenja također će se značajno razlikovati ovisno o etiologiji hepatitisa.

Uzimajući u obzir gore navedeno, vrlo hitan problem je adekvatna etiološka dijagnoza virusnog hepatitisa s identifikacijom specifičnog uzročnika. To je nemoguće bez primjene suvremenih molekularno bioloških metoda. Stoga je dijagnosticiranje hepatitisa pomoću metode lančane reakcije polimeraze jedan od najvažnijih koraka u utvrđivanju uzroka bolesti i određivanju daljnje taktike liječenja.

PCR u dijagnostici HIV infekcije

Trenutno se za laboratorijsku dijagnostiku HIV infekcije koristi najpristupačniji i ujedno najosjetljiviji pristup - otkrivanje protutijela na HIV u krvi pomoću enzimskog imunoanalize (ELISA) - nakon čega slijedi potvrda pozitivnih rezultata analiza korištenjem imunoblotinga (IB). Učinkovitost identificiranja ljudi zaraženih HIV-om ovim pristupom može doseći 99% ili više.

Ali serološka dijagnoza HIV infekcije ima niz ograničenja:

1. Neučinkovitost tijekom razdoblja tzv “serološki prozor” (u prvim tjednima nakon infekcije protutijela se ne otkrivaju zbog njihove odsutnosti ili niske koncentracije).
2. Protutijela na HIV već se dugo otkrivaju kod sve djece rođene od majki zaraženih HIV-om.
3. Lažno pozitivni rezultati ELISA-e zbog prisutnosti antitijela na antigene slične HIV antigenima u krvi.
4. Lažno negativni i upitni rezultati ELISA i imunoblotinga (osobito u bolesnika u terminalnoj fazi bolesti).

Stoga se sve više koriste PCR testovi za probir HIV infekcije. Prema „Metodološkim preporukama za testiranje na HIV infekciju” (odobreno od strane Ministarstva zdravstva i socijalnog razvoja Ruske Federacije 08/06/2007) „ako postoje epidemiološki kriteriji koji ukazuju na nedavni rizik od HIV infekcije za pacijente i na istodobno vjerojatno lažno pozitivni ili lažno negativni rezultati ELISA-e i IB-a, npr. Kod pregleda djece rođene od majki zaraženih HIV-om, ili pacijenata tijekom razdoblja „seronegativnog prozora“, koristi se PCR metoda koja otkriva HIV genski materijal...” A u slučaju već postavljene dijagnoze HIV infekcije, PCR analiza služi za prognozu, dinamičko promatranje i praćenje terapije.

• Virus humane imunodeficijencije, kvalitativno određivanje DNA provirusa, PCR
• Kvantitativno određivanje RNK virusa humane imunodeficijencije, PCR
• Sveobuhvatna dijagnostika: kvalitativno određivanje RNK virusa hepatitisa C/DNK virusa hepatitisa B/RNK virusa humane imunodeficijencije (HIV) tipa 1 i 2

U Centru za molekularnu dijagnostiku (CMD) možete anonimno napraviti PCR test na HIV.

Zašto su HIV i AIDS tako strašni, koje dijagnostičke metode postoje. Detaljne informacije o PCR studijama.

Prema statistikama Svjetske zdravstvene organizacije zajedno s UN-ovom organizacijom UNAIDS, u proteklih četrdeset godina od HIV-a i AIDS-a umrlo je više od 25 milijuna pacijenata. Nisu uzalud epidemiolozi HIV prozvali kugom 20. stoljeća, jer su štete koje ova infekcija čovječanstvu nanosi ogromne. Najviše su zaražene zemlje afričkog kontinenta. Zaraza teško pogađa gospodarstva ionako nestabilnih država, a ljudi su oskudni.

Kada se pojave simptomi, brza dijagnoza je izuzetno važna. infekcija tijela HIV infekcijom, jer pravovremeni tijek terapije može spasiti ili barem produžiti život pacijenta. Danas je tehnološki napredak daleko odmakao: izumljene su najnovije metode za dijagnosticiranje virusa HIV-a i AIDS-a, liječenje je dostupno svakom čovjeku na planeti, pouzdanost testova karakterizira mali stupanj pogreške, a terapija je vrlo učinkovit.

Dijagnoza HIV infekcije

U našoj zemlji utvrđivanje prisutnosti HIV infekcije u tijelu pacijenta je kompleks analiza:

• Vezani imunosorbentni test
• Imunološki bloting
• Lančana reakcija polimerazom
• Ekspresni testovi

Enzimski imunološki test.

Probir (ELISA test) je početna faza određivanja infekcije u tijelu. Temelji se na proteinskim spojevima virusa nastalim u umjetnim uvjetima, koji identificiraju antitijela koja proizvode imunološke stanice kao reakciju na infekciju. Događa se kemijska reakcija između reagensa, zbog čega indikatorski element mijenja boju. To znači da je rezultat testa pozitivan. Informacije ovom metodom mogu se dobiti unutar nekoliko tjedana od trenutka infekcije. Ovom metodom se ne otkriva prisutnost infekcije u bolesnika, ali se utvrđuju proizvedena protutijela na ovu infekciju. Dešava se da proizvodnja antitijela počinje 10-15 dana nakon infekcije, ali u velikoj većini slučajeva kasnije - nakon 1-1,5 mjeseci.

Podaci o takvoj analizi obrađuju se od dva do deset dana.

Pouzdanost dijagnoze za HIV potkrijepljena je IB analizom. Isključivo pozitivan test IB za virus može poslužiti kao valjan razlog za tvrdnju o infekciji.

Suština analize:

Uzima se uzorak venske krvi za analizu u laboratoriju. Uzorak se dodatno priprema, proteinski spojevi koji su prisutni u njemu se elektrificiraju u komori za ispitivanje, zatim se na odgovarajući način raspoređuju u supstancu gela. Molekularna težina. U pripremljeni uzorak stavlja se nekoliko puta papirnata traka premazana reagensom. Ako u uzorku ima protutijela na virus, dolazi do kemijske reakcije i na test traci postaju vidljive linije. Kada se pojave 2 ili 3 crtice p24, gp41 i gp120 ili gp160, rezultat testa je pozitivan.

Ako se dobije pozitivan rezultat IB analize, s pogreškom od jedan posto, može se zaključiti o prisutnosti HIV infekcije u organizmu.

Brzi testovi na HIV i AIDS

Najnovije tehnologije za određivanje virusa imunodeficijencije u tijelu su ekspresne metode. Informacije o takvoj analizi mogu se dobiti u roku od nekoliko minuta nakon završetka. Najveću pouzdanost imaju imunokromografski testovi - posebne test trake na čiju je površinu raspršen sloj reagensa. Protutijela sadržana u ispitivanom materijalu dolaze u kontakt s reagensom, mijenjajući boju indikatora. Nakon nekoliko minuta pojavljuju se dvije pruge koje ukazuju na prisutnost infekcije. Prisutnost jedne linije znači da nema infekcije.

Takav test može se koristiti kao dodatni, informacije o takvom testu nužno potvrđuju druge studije.

Koliko košta brzi test na HIV?

Brzi test na HIV koštat će u prosjeku 200-1000 rubalja.

HIV PCR jedna je od najpouzdanijih metoda za postavljanje ove po zdravlje i život opasne dijagnoze. Liječnik može preporučiti testiranje svakoj osobi koja ima razloga sumnjati na infekciju virusom humane imunodeficijencije. Pacijenti se često pitaju što je bit tehnike te koje su njezine prednosti i nedostaci.

Kada i u kojem roku trebate posjetiti bolnicu radi predaje biomaterijala na istraživanje?

PCR je dijagnostički pristup koji se u kliničkoj medicini pojavio zahvaljujući molekularnoj biologiji. Upravo iz ove grane znanosti istraživanja su došla u medicinu. I počeo se aktivno koristiti za postavljanje različitih dijagnoza, uključujući HIV infekciju.

Svi znaju da se svaki živi organizam sastoji od DNK i RNK. Lančana reakcija polimeraze temelji se na sposobnosti ovih nukleinskih kiselina da se samorepliciraju.

Važno je zapamtiti da je PCR sposoban otkriti čak i male koncentracije virusnih čestica u krvi. To se događa zbog činjenice da u biološkoj tekućini cirkuliraju "fragmenti" nukleinskih kiselina, koji se hvataju i prepoznaju posebnom opremom. To vam omogućuje da postavite ispravnu dijagnozu čak i ako se infekcija dogodila vrlo nedavno.

A virusne čestice još nisu imale vremena umnožiti se u tijelu pacijenta. Biološki materijal dobiven od pacijenta stavlja se u poseban reaktor. Najčešće se koristi venska krv.

Posebne komponente, u interakciji s virusnim česticama, uvelike povećavaju broj otkrivenih fragmenata. Kao rezultat toga, fragmenti postaju prepoznatljivi, mogu se procijeniti i izvući zaključci o infekciji.

Darujte krv iz vene prema standardnoj metodi.

Nemojte jesti prije posjeta liječniku, bolje je doći ujutro. Ako pacijent prolazi kroz imunostimulaciju, mora se prekinuti dva tjedna prije testa.

Prednosti i mane tehnike

Kao i svaka druga metoda za dijagnosticiranje određene bolesti, PCR testiranje ima niz prednosti i nedostataka. Prednosti metode uključuju:

• mala vjerojatnost nailaska na lažno negativan ili lažno pozitivan rezultat;
• mogućnost korištenja ne samo krvi za istraživanje, već i drugih bioloških tekućina, kao što su vaginalni iscjedak, sjeme itd. (međutim, kako liječnici primjećuju, točnost se može smanjiti);
• mogućnost korištenja jednom uzetog materijala za dijagnosticiranje nekoliko bolesti odjednom;
• brzina dobivanja rezultata (ako je analiza hitna, rezultati se dobivaju već sljedeći dan);
• sposobnost brzog dijagnosticiranja infekcije i, sukladno tome, početka liječenja bolesti, čime se poboljšava prognoza;
• nema dobnih ograničenja (vađenje krvi iz vene može se provesti čak i kod novorođenčeta).

Naravno, PCR ima i nedostatke. To uključuje:

• prilično visoka cijena studije, osobito u usporedbi s osnovnim metodama probira koje se koriste u većini bolnica;
• potreba za sofisticiranom opremom, koja je također skupa;
• još uvijek postoji mogućnost nailaska na lažne rezultate ako je tehnologija analize, proces uzimanja krvi pokvaren ili ako osoba boluje od autoimune, tumorske ili kronične zarazne bolesti.

Naravno, PCR testiranje treba obaviti po preporuci liječnika.

Liječnik će u svakom konkretnom slučaju moći procijeniti koliko će rezultati biti pouzdani. Ako liječnik smatra da je to potrebno, savjetovat će svom pacijentu drugu dijagnostičku metodu umjesto PCR-a. Ili će nakon primitka rezultata nadopuniti dijagnostički akcijski plan dodatnom stavkom.

Mnogi pacijenti su zabrinuti oko pitanja podvrgavaju li se svi ljudi PCR testiranju na HIV. Zapravo, dijagnoza nije potrebna svima. Međutim, postoje skupine pacijenata koji povremeno moraju dati krv na analizu.

• Preliminarna dijagnoza

• Pozitivan test imunoglobulina

Imunobloting koji daje pozitivan rezultat na virus humane imunodeficijencije nužno se potvrđuje lančanom reakcijom polimerazom. Učinite isto ako je prvo proveden PCR. Međusobno nadopunjavanje studija gotovo u potpunosti eliminira mogućnost pogrešaka.

• Kontrola terapije

Pacijenti s potvrđenim HIV statusom dosta redovito daju krv za PCR testiranje. To je potrebno kako bi se pratio napredak liječenja i, ako je potrebno, prilagodila terapija.

• Procjena sigurnosti krvi

Svaka donirana krv mora biti testirana lančanom reakcijom polimerazom.

Time se eliminira prijenos HIV infekcije putem transfuzije krvi.

• Procjena statusa novorođenčeta

Ako je dijete rođeno od HIV pozitivne žene, on također mora biti podvrgnut PCR-u. To je neophodno kako bi se utvrdio status djeteta i razvila taktika za njegovo daljnje upravljanje.

Pouzdanost studije

Mnogi pacijenti su zabrinuti oko pitanja koliko je pouzdana lančana reakcija polimeraze ako planiraju dijagnosticirati virus humane imunodeficijencije. Unatoč činjenici da je PCR jedna od najmodernijih metoda, još uvijek joj ne možete vjerovati 100%.

Danas se PCR još uvijek ne koristi kao metoda probira upravo zato što može dati lažno pozitivne rezultate.

Kako bi se to izbjeglo, liječnici preporučuju pravilnu pripremu za prikupljanje biomaterijala, ali ni priprema ne pomaže uvijek. Na primjer, test može dati pozitivan rezultat ako osoba ima maligni tumor u tijelu. Ako boluje od bilo koje kronična infekcija ili npr. autoimuni proces. Čak i unatoč mogućnosti dobivanja lažno pozitivnog rezultata, PCR se u praksi koristi kao jedna od najpouzdanijih metoda.

Kako bi uklonili pogreške, liječnici često preporučuju svojim pacijentima da ponove test ako je rezultat pozitivan. Također, u nekim slučajevima, preporuča se dodatno provesti ELISA reakciju i druge studije. Provođenje skupa testova uvijek daje pouzdaniji rezultat nego provođenje samo jedne studije.

Za što se test može koristiti?

Ne znaju svi pacijenti za što se točno lančana reakcija polimeraze koristi u liječničkoj kliničkoj praksi.

• Potrebno je otkriti bolest u latentnom razdoblju

Virus imunodeficijencije može postojati latentno u tijelu dugo vremena.

PCR je jedini test koji može pokazati prisutnost patogena u tijelu. Čak i ako još uvijek ima vrlo malo virusnih čestica.

• Utvrđivanje genotipa

Danas je identificirano nekoliko genotipova HIV infekcije. Često je važno utvrditi koji je specifični genotip zarazio osobu, jer o tome ovisi izbor antivirusnih lijekova.

• Određivanje virusa, a ne antitijela na njega

Jedna od prednosti analize je ta što tehnika ne može detektirati antitijela na virusne čestice, već sam virus.

Mnoge pacijente zanima zašto je to prednost. Radi se o tome da ako je naglasak na otkrivanju samog patogena, smanjuje se vjerojatnost nailaska na lažno pozitivne reakcije zbog sličnosti različitih antitijela. Kako liječnici primjećuju, u mnogočemu je sposobnost otkrivanja samog virusa, a ne antitijela, učinila tehniku ​​tako učinkovitom.

Kada je rok?

Pacijenti su često zainteresirani za pitanje koliko dugo treba posjetiti liječnika za doniranje biološkog materijala.

Sve ovisi o tome što točno planirate odrediti pomoću tehnike.

Preporuča se tražiti DNK virusa humane imunodeficijencije ako se sumnja na infekciju i ako je potrebna rana dijagnoza. U prosjeku se DNK u krvi počinje detektirati deset dana nakon što se infekcija dogodi. Međutim, preporuča se potvrditi analizu ELISA testom, prvo nakon 4 tjedna od infekcije, a zatim nakon 12 tjedana.

Ako ELISA potvrdi dijagnozu, status bolesnika se smatra pozitivnim.

Istraživanja za određivanje RNA uvijek su kvantitativna. Preporuča se ako se potvrdi pozitivan status bolesnika i započne liječenje antivirusnom terapijom. Ako u tijelu ima puno RNK, tada se dijagnosticira akutna faza bolesti. Ako to nije dovoljno, smatra se da je suzbijanje uzročnika bilo uspješno, te se terapija može promijeniti na blažu.

• Procjena otpora

Neki sojevi HIV-a otporni su na lijekove koji se koriste za njihovo liječenje. Također se preporučuje ispitivanje za procjenu vjerojatnosti izostanka odgovora na liječenje. Provodi se ako nakon propisane terapije nema poboljšanja. Također se preporučuje tijekom akutnog razdoblja zaraznog procesa.

Virus humane imunodeficijencije se svake godine sve više širi ljudskom populacijom. Svaka se osoba može susresti s patologijom, pa je ponekad važno znati kako postaviti ispravnu dijagnozu.

PCR – dobra metoda dijagnoza ako je liječnik ispravno koristi. A glavna stvar za pacijenta je slijediti preporuke liječnika za pripremu za studiju, koje nisu komplicirane.

Preporučamo čitanje

Tablete

Što znači antisemitizam? Što se dogodilo. Antisemitizam i obrazovanje

Tablete

Kuća Gorkog na Nikitskoj

pametni telefoni

Svinjski šiš kebab u tavi - pripremite svoje omiljeno jelo kod kuće!

pametni telefoni

Lecho od paprike za zimu - polizat ćete prste

Windows upute

Kako se riješiti loše sreće u životu

pametni telefoni

Čarobni zaštitni šapat i čarolije