Ako nás oklamú PCR diagnostikou HIV. PCR výskum - moderná diagnostika HIV, AIDS PCR diagnostika HIV infekcie

To, že sme boli oklamaní HIV/AIDS 30 rokov, je lekársky fakt, ktorá už dávno nepotrebuje žiadny dôkaz. Nechcem nikoho uraziť, ale pravdou je, že v tejto chvíli, keď mám pred sebou všetky dostupné informácie o alternatívnom uhle pohľadu, teda prezentovanom HIV disidentmi, sa jednoducho nedá pokračovať a naivne veriť v umelo vytvorenú a vnútenú pomocou cynickej a klamlivej propagandy teórie HIV/AIDS.

Ak ste vyjadrili svoje zmätok nad tým, že diagnostické testy na HIV nezisťujú samotný vírus, ale len protilátky proti nemu, a to sa týka nielen enzýmovej imunoanalýzy, ale aj imunoblottingu, ktorý sa považuje za presnejší, potom pravdepodobne ste počuli ubezpečenia lekárov alebo niektorých znalých ľudí, že existuje metóda polymerázovej reťazovej reakcie, ktorá nemá nič spoločné s protilátkami, ale priamo deteguje samotný vírus.
Počuli ste už o diagnostickej metóde PCR a konkrétne o infekcii HIV? Pre istotu. Skúsili ste sa v tom trochu ponoriť a prísť na to? nie? Takže je jasné, že nás klamú? Dobre. Ale teraz to ukážem jasne, na prstoch...

Áno, sme naozaj nehorázne a cynicky oklamaní, keď nás ubezpečujú, že PCR test na HIV určuje prítomnosť samotného vírusu alebo jeho koncentráciu v krvi, teda vírusovú záťaž. A hneď poviem, že v tomto ohľade sa metóda PCR nielenže nelíši od ELISA a IB, ale dá sa povedať, že je priamo založená na presne rovnakom princípe.
Čo to znamená? Pripomínam, že diagnostické HIV testy ELISA a Immunoblot sú založené na reakcii protilátok v testovanej vzorke s vírusovými antigénmi umiestnenými v samotnom teste. Čo je v testovacích systémoch ako tieto HIV proteíny - vie len Boh a pravdepodobne nie všetko. V súlade s tým je úplne nejasné, ktoré protilátky reagujú s týmito údajnými HIV proteínmi, čo vedie k 62-položkovému zoznamu chorôb a stavov, ktoré spôsobujú falošne pozitívnu reakciu.

Čo je základom metódy polymerázovej reťazovej reakcie a ako sa diagnostikuje infekčné choroby? V prípade hepatitídy a HIV sa vyšetruje krv pacienta. Na stanovenie prítomnosti špecifického patogénu v skúmanej vzorke krvi sa na testovanie PCR používa primér, to znamená fragment DNA samotného patogénu, ktorý je komplementárny k špecifickej časti jeho DNA, to znamená v podstate Primér je pripojený k úseku DNA rovnakým spôsobom, ako sú úseky navzájom spojené dvojitou špirálou DNA.
Máš to? Odoberie sa vám krv, potom sa do nej pridá niečo, čo je údajne nepochybne unikátnou súčasťou genómu vírusu HIV, pridajú sa ďalšie potrebné ingrediencie, potom sa to celé tridsaťkrát zahreje a ochladí a výsledok je voilá! si HIV pozitívny! vaša vírusová záťaž je 3 milióny! okamžite začnite liečbu!

Ale počkaj. Nevidíš, ako ťa klamú od samého začiatku?
Boli ste ubezpečení, že metóda PCR deteguje samotný vírus. Ale toto je absolútna lož! Metóda PCR sa v tomto ohľade nelíši od ELISA a IB! Tak ako sa v testovacích systémoch používajú neznáme veci pod rúškom HIV antigénov, tak aj v PCR testoch sa pod rúškom primerov vydávaných za súčasť DNA samotného HIV používa rovnakým spôsobom úplne neznáma látka. Chápete, že ak HIV neexistuje, potom nemôže byť reč o žiadnej HIV DNA, HIV RNA, alebo protilátkach proti HIV, najmä materských protilátkach, ktorými nás oklamú tým, že nám povedia, že všetky deti od HIV pozitívnych matiek a samy zmiznú v druhom roku života...

Páči sa ti to.
- Metóda PCR detekuje samotný vírus HIV, tu nemôže dôjsť k omylu ani pochybnostiam! A táto najpresnejšia metóda ukazuje vírusovú záťaž, ktorá je veľmi dôležitá pre sledovanie dynamiky ochorenia a jeho liečby!
- No, dobre... Hovoríš o samotnom víruse? Čo sa používa ako základný náter? Ten istý vírus? Ten istý, ktorý pred 30 rokmi objavili Montagnier a Gallo? Naozaj ho našli? Naozaj upratané? Naozaj ste sa odfotili? Naozaj je dokázané, že na replikáciu/rozmnožovanie využíva T-lymfocyty, v dôsledku čoho dochádza k vyčerpaniu ich celkového počtu a vzniká nebezpečná imunodeficiencia? Je to všetko pravda?

A v podstate sa metóda PCR v AIDS nepoužíva ani tak vďaka jej vynálezcovi Karymu Mullisovi (skôr, dokonca v rozpore s jeho názorom!), ale vďaka Montagnovi a Gallovi, ktorí vytiahli HIV zo vzduchu a ktorých DNA primery sa používajú pri PCR diagnostike HIV...

Takže tu to je. Ak vám bolo povedané, že na základe výsledkov PCR testov ste HIV pozitívny a máte vysokú vírusovú záťaž, alebo hovoríme o vašom dieťati, netrápte sa ani chvíľu! ste nehanebne klamaní! Vynálezca metódy polymerázovej reťazovej reakcie, mikrobiológ Kary Mullis, je HIV disident a je kategoricky proti použitiu PCR pri diagnostike HIV, pretože dobre chápe, že v prípade neexistujúceho vírusu HIV ide jednoducho o do očí bijúci cynický podvod...

Ešte moment. Počuli ste o nedetegovateľnej vírusovej záťaži? Faktom je, že nie všetci HIV pozitívni ľudia pri testovaní na množstvo vírusu v krvi dostanú určitý výsledok, ktorý sa v závislosti od hodnoty považuje za nízku alebo vysokú vírusovú záťaž. Keby takých ľudí bolo veľmi málo, vôbec by sa o nich nehovorilo. Faktom však je, že ich je zjavne veľa, a preto hovoria o nedetegovateľnej vírusovej záťaži pri infekcii HIV. Nebudem spomínať PR terapiu, ktorá vraj znižuje VL na nedetekovateľné. Nie, faktom je, že bez akejkoľvek terapie sa to u mnohých ľudí nezistí. Nikdy.
To znamená, že pacient je diagnostikovaný s infekciou HIV, ale s pomocou slávneho supersenzitívneho kozmického presná metóda PCR diagnostika nedokáže odhaliť vírus HIV v jeho tele. Ako to?

A potom nám povedia, že metóda je, samozrejme, unikátna, ale moderné technické prostriedky stále kladú obmedzenia a väčšinaaaaaaaaaaaaaaaaaa.

To znamená, že pacient má nepochybne HIV. Vírus je nevyliečiteľný, nezničiteľný, prefíkaný, zákerný, zlomyseľný, mimoriadne chytrý a vynaliezavý. A ani supermagická metóda PCR nie je schopná odhaliť, kde sa skrýva prefíkaný vírus pred vedcami a lekármi.
Ukazuje sa, že na jednej strane nám hovoria, aká je to úžasná a veľmi presná metóda PCR, dokáže z jednej molekuly uhádnuť celého slona a dokonca aj veľrybu – a na druhej strane so sklopenými očami mrmú nejasne o nedetegovateľnej vírusovej záťaži u tisícok pacientov, ktorí už desaťročia žijú s diagnózou HIV infekcie a neužívajú antiretrovírusovú liečbu.

Tak to ide. Klamú nás, ako sa im zachce. Nebojte sa idiotov. Neberte slovo žiadneho lekára alebo vedca. Trikrát sedemkrát vám povedia o kozmickej presnosti testov PCR, ale iba jedna poznámka o priméroch HIV použitých v tomto prípade okamžite rozbije celý veľkolepý obraz na kúsky. Pretože pre zaujímavosť môžeme povedať, že tak ako si Gallo patentoval prvé testy na HIV, keď objavil falošný vírus HIV, rovnakým spôsobom si mohol nechať patentovať priméry HIV na diagnostiku infekcie HIV pomocou PCR, pretože priméry sú v podstate to isté, že HIV antigény sú niektoré špecifické biologické látky vlastné iba tomuto vírusu (fragmenty genómu alebo špecifické proteíny)...

HIV PCR je jednou z najinformatívnejších metód molekulárnej genetickej diagnostiky. Táto metóda pomáha identifikovať rôzne druhy infekčných ochorení a chorôb u pacienta, ktoré sú zdedené. Rovnaká diagnostická metóda je použiteľná aj v prípade testovania biomateriálu na prítomnosť HIV, závažného ochorenia, ktoré sa u pacienta vyvíja počas celého života. S zdravotná starostlivosť PCR patrila medzi odporúčané testy vykonávané na platenom základe v prípadoch podozrenia na vírus ľudskej imunodeficiencie. Spoľahlivosť štúdie je však opodstatnená len v 80 zo 100 prípadov.

PCR diagnostika pre HIV znamená polymerázovú reťazovú reakciu. Na tento typ výskumu používajú Rôzne druhy biologické materiály. Medzi nimi je krv, okrem toho sa môže použiť sekrét z vagíny pacienta alebo semenná tekutina u mužov.

Pozor! Sliny sa nepoužívajú na PCR pri diagnostike HIV. Tento prístup sa považuje za neúčinný, pretože protilátky proti HIV sú v tomto materiáli v minimálnej koncentrácii. To isté platí pre moč, pot a slzy.

Indikáciou pre opísanú štúdiu je dvojito pozitívna ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). O alternatívnych úlohách sa bude diskutovať neskôr.

Podrobnosti o podstate analýzy

PCR test na HIV je založený na schopnosti nukleovej kyseliny reprodukovať sa nezávisle. Živé bunky pozostávajú z bielkovín a tých istých kyselín, inými slovami, RNA a DNA. Molekuly fungujú ako strážcovia genetického kódu.
Pri nízkej koncentrácii vírusových častíc (HIV) v biomateriáli vzorka neobsahuje celé reťazce DNA (kyselinu deoxyribonukleovú), ale len ich zložky, nazývané nukleotidy. Analýza vám umožňuje odhaliť aj malé zvyšky buniek vírusu. Práve táto skutočnosť vysvetľuje schopnosť PCR demonštrovať výsledky na skoré štádia- niekoľko týždňov po infekcii HIV.

Najlepšie výsledky z polymerázovej reťazovej reakcie možno očakávať pri vyšetrovaní venóznej krvi. Vzorka sa štiepi pomocou zariadenia. Frakcie sa potom podrobia enzymatickému spracovaniu. Reaktívne látky sa spájajú s časticami vírusovej DNA, aby sa duplikovali. Počet takýchto prvkov sa zvyšuje podľa princípu reťazca, kým ich prítomnosť (nie protilátok) v krvi pacienta nezaznamená laboratórni technici. Žiadna z nich nepracuje na úplne rovnakom princípe. existujúce metódy diagnostika

Reakčné zložky

Pomocou metódy PCR sa môžete vopred dozvedieť o vývoji vírusu v tele. Prečo sa to nedá nazvať populárnym v oblasti bezplatnej medicíny a robiť to všade? Faktom je, že takýto test HIV je veľmi drahý a vyžaduje nasledujúce komponenty:

• matricu deoxyribonukleovej kyseliny zahŕňajúcu segment DNA určený na amplifikáciu;
• dva priméry (pre každý segment reťazca);
• chemicky aktívna polymerázová zložka na urýchlenie polymerizácie vírusových častíc;
• deoxyribonukleozid trifosfáty;
• častice dvojmocného horčíka (nabité);
• špeciálne riešenie pre tvorbu priaznivé podmienky poskytujúce správnu úroveň kyslosti, koncentrácie soli a počtu horčíkových častíc v kvapaline.

Pozor! Na ochranu vzorky pred prehriatím sa do materiálu pridáva malé množstvo vazelíny, ktorá obsahuje tuky, a teda vysoká teplota vriaci.

Relatívne vysoká presnosť analýzy sa vysvetľuje jej zvýšenou citlivosťou, ktorá stimuluje reakciu na protilátky proti iným vírusom.

Výhody a nevýhody techniky PCR pre HIV

Pre objektívne vyhodnotenie metódy uvádzame v tabuľke nižšie množstvo výhod a nevýhod štúdie:

Je zrejmé, že výhod tejto techniky je viac. Ak hodnotíme typ diagnózy z hľadiska produktivity ďalšej liečby a možnosti predĺženia života pacienta, PCR je najistejšia cesta k úspechu.

Vlastnosti analýzy

Hlavnou črtou opísanej analýzy je jej schopnosť včas diagnostikovať HIV, čo iné výskumné metódy nedokážu. Koľko dní po podozrení na infekciu môžem darovať krv na PCR? Toto časové obdobie je zvyčajne 10-14 dní. Počas nasledujúcich 24 hodín dostane pacient výsledok. Prípadné odchýlky v termínoch vysvetľujú jednotlivé prevádzkové podmienky diagnostických centier a ambulancií.

Účel štúdie

PCR sa väčšinou vykonáva na detekciu HIV (syndróm ľudskej imunodeficiencie). Test je však možné podstúpiť aj pri podozrení na vznik pohlavne prenosných chorôb. Rovnaká metóda je použiteľná v prípade diagnostiky dedičných chorôb.

PDR diagnostika: dôvody na vykonanie

Kedy by ste mali darovať krv na PCR? Vo väčšine prípadov sa biologický materiál daruje, keď sa vírus ľudskej imunodeficiencie prispôsobí podmienkam tela, stimuluje tvorbu protilátok a spôsobuje prvé príznaky HIV. To je však opodstatnené iba vtedy, ak po infekcii uplynul dostatočný čas a vyžaduje sa test ELISA.

Potreba PCR vzniká z iniciatívy pacienta, ktorý chce rýchlo diagnostikovať ochorenie (ak existuje). Dôvodom môže byť: nechránený pohlavný styk, kontakt s biologickým materiálom infikovanej osoby, nedávna transfúzia krvi atď.

Komu je predpísaná PCR?

Stanovenie infekcie HIV pomocou PCR sa na odporúčanie špecialistu vykonáva v nasledujúcich prípadoch:

• predbežná diagnóza. PCR presne potvrdí alebo vyvráti výsledok ELISA;
• imunobloting potvrdil diagnózu. Imunitný blotting je ďalším spôsobom štúdia AIDS . Obe metódy sa používajú spoločne, čo vylučuje možnosť nesprávnej diagnózy;
• s potvrdeným HIV statusom pomocou PCR sa sleduje účinok zvolenej liečby;
• na rozbor krvi darcov na prítomnosť protilátok proti HIV;
• na určenie HIV statusu novorodenca, keď je test matky pozitívny. PCR v prvých dňoch života umožňuje určiť vnútromaternicovú infekciu alebo infekciu dieťaťa pri prechode pôrodnými cestami. Test sa vykonáva 2-3 týždne po narodení.

Ako dlho trvá vykonanie testu PCR a kde ho možno vykonať?

Analýza HIV PCR sa vykonáva v špeciálnom laboratóriu. Samotný test a interpretácia výsledku si nevyžadujú veľa času: mesiac alebo dokonca týždeň. Odber krvi trvá až 6 minút. V bežnom prípade špecialista nebude potrebovať viac ako jeden deň na stanovenie diagnózy a vydanie záveru. Prvých 8 hodín sa venuje štúdiu krvi, zvyšný čas sa venuje registrácii. Výsledok je možné odobrať hneď nasledujúci deň po odobratí vzorky. Trvanie expresného testovania je 2 hodiny.

Pozor! Povinné zdravotné poistenie umožňuje absolvovať test zadarmo vládna agentúra zdravotná starostlivosť.

Takmer každé komerčné laboratórium je schopné vykonávať výskum a to na anonymnom základe. Osoba má pridelené špeciálne číslo, ku ktorému sa následne pripájajú výsledky. Tieto informácie sa nahrajú na webovú stránku inštitúcie na adrese Osobná oblasť užívateľ.

Koľko stojí vykonanie testu PCR?

Tento spôsob výskumu je dosť drahý. Je to spôsobené tým, že PCR sa musí vykonávať na najnovšom zdravotníckom zariadení, manipulácia si vyžaduje, aby špecialisti mali dostatočné množstvo vedomostí.

Naliehavá otázka znie: koľko to stojí, aby si človek urobil PCR test na HIV? To si bude vyžadovať približne 56-60 dolárov.

Vykonávanie analýzy

Testovanie PCR na HIV zahŕňa:

• odber vzoriek krvi na výskum;
• dodatočný odber spermií od muža a pohlavného sekrétu od ženy.

Pozor! Výsledkom je, že test umožňuje lekárom určiť vysokú vírusovú záťaž, aby mohli sledovať stav pacienta.

Ďalšie vlastnosti tohto testu HIV, ktoré je potrebné vziať do úvahy:

• pár dní pred testom by mal pacient znížiť množstvo tučných jedál v strave;
• Krv sa odoberá na prázdny žalúdok;
• K rozštiepeným biologickým materiálom sa v špeciálnom reaktore pridávajú enzýmy, ktoré syntetizujú rôzne infekcie;
• analýza sa vykonáva v niekoľkých fázach, pretože delenie molekúl prebieha aritmetickým postupom. Špeciálny program porovnáva veľké množstvo bunkových štruktúr na detekciu HIV.

Presné diagnostické metódy, ktoré zahŕňajú PCR, sú drahé, ale sú schopné odhaliť HIV v počiatočných štádiách. Pri liečbe takýchto patológií je najdôležitejšia správna a včasná diagnóza, ktorá môže zlepšiť kvalitu života človeka a jeho trvanie.

Popis

Polymerázovú reťazovú reakciu (PCR) vynašiel v roku 1983 americký biochemik Carey B. Mullis. V roku 1993 mu bola za tento objav udelená Nobelova cena.

Dnes sú oblasti použitia PCR: moderná metóda molekulárnej biológie sú mimoriadne široké. Špeciálne miesto zaujíma PCR diagnostika lekárska prax. A dôvod je celkom jednoduchý: polymerázová reťazová reakcia robí nemožné možným.

PCR diagnostika sa často obrazne opisuje ako metóda, pomocou ktorej môžete nájsť ihlu v kope sena a potom z týchto ihiel postaviť kopu sena. "Ihla" je malý kúsok genetického materiálu bunky (DNA alebo RNA).

Objav tejto metódy je teda jednou z najpozoruhodnejších udalostí v oblasti molekulárnej biológie za posledné desaťročia. Vývoj metódy PCR umožnil vo všeobecnosti medicínsku diagnostiku povýšiť na kvalitatívne novú úroveň.

Základy PCR

Základom metódy je opakované selektívne kopírovanie (amplifikácia) určitého úseku DNA s cieľom získať také množstvo genetického materiálu, ktoré bude postačovať na vizuálnu detekciu. V tomto prípade sa mnohokrát skopíruje (amplifikuje) len daný úsek DNA za predpokladu, že je prítomný v skúmanom biomateriáli.

Výskum navyše okrem jednoduchého zvýšenia počtu kópií rezov DNA umožňuje aj ďalšie manipulácie s genetickým materiálom. Preto je metóda široko používaná vo vedeckom výskume, biologickej a lekárskej praxi: pri diagnostike infekčných a dedičných chorôb, pri identifikácii mutácií, genotypizácii, určení otcovstva, osobnej identifikácii atď.

PCR v diagnostike infekčných ochorení

Dnes je PCR diagnostika infekcií jednou z najpresnejších, najcitlivejších a najúčinnejších klinických štúdií laboratórne metódy. Okrem toho je rozsah detekovaných patogénov prakticky neobmedzený - bol by vyvinutý testovací systém pre PCR analýzu požadovaného patogénu.

Vďaka vysokej citlivosti vám PCR umožňuje identifikovať patogén aj s jeho minimálnym obsahom (to znamená, že v skúmanom biomateriáli je prítomných len niekoľko molekúl jeho DNA).

PCR deteguje patogény infekčných chorôb, keď to nemožno urobiť inými metódami (imunologickými, kultivačnými, mikroskopickými). Preto sa pre množstvo infekčných agens metóda polymerázovej reťazovej reakcie stala „zlatým štandardom“, je overená časom a klinicky. V modernej laboratórnej diagnostike infekčných ochorení je PCR najcitlivejšou a najšpecifickejšou metódou na priamu detekciu patogénov. To umožňuje nielen stanoviť etiológiu ochorenia, ale aj sledovať priebeh infekčného procesu a vyhodnotiť účinnosť liečby.

Testovanie STI pomocou metódy PCR je relevantné najmä pri asymptomatických infekčných procesoch spôsobených bezpodmienečne patogénnymi mikroorganizmami (chlamýdie, kvalitatívne stanovenie DNA; mykoplazma, kvalitatívne stanovenie DNA; pôvodca kvapavky, kvalitatívne stanovenie DNA; pôvodca trichomonózy, kvalitatívne stanovenie DNA). Napríklad pri chronickej kvapavke u žien, dokonca aj pomocou bakteriologickej metódy, často nie je možné identifikovať gonokok, napriek existujúcim príznakom chronického zápalového procesu v krčku maternice alebo močovej trubici.

Moderná PCR diagnostika umožňuje nielen identifikovať genetický materiál infekčných agens, ale aj určiť ich koncentrácie DNA/RNA (formát kvantitatívneho výskumu). Určenie počtu patogénov je dôležité pri rozhodovaní o liečbe, najmä ak sú identifikované oportúnne mikroorganizmy (Mykoplazma, kvantitatívne stanovenie DNA; Typizácia Ureaplazmy, kvantitatívne stanovenie DNA).

Jedným z hlavných smerov vo vývoji metódy PCR je formát „Multiprime“ vyvinutý v CMD, ktorý umožňuje odhaliť niekoľko patogénov v jednej skúmavke (a jednej reakcii).

• Patogény infekcií prenášaných kliešťami ixodidmi

PCR diagnostika hepatitídy

V súčasnosti je známych minimálne 5 vírusov, ktorých schopnosť spôsobiť poškodenie pečene je dokázaná. Toto sú pôvodcovia hepatitídy A, B, C, D, E. V zriedkavých prípadoch môže byť hepatitída spôsobená vírusmi Epstein-Barr a herpes simplex. Schopnosť agens, ako sú vírusy TT a hepatitídy G infikovať pečeň, dnes nepozná každý. Všetky tieto vírusy patria do rôznych rodín, majú rôzne biologické vlastnosti, a preto sa taktika liečby bude tiež výrazne líšiť v závislosti od etiológie hepatitídy.

Ak vezmeme do úvahy vyššie uvedené, veľmi naliehavým problémom je adekvátna etiologická diagnostika vírusovej hepatitídy s identifikáciou konkrétneho patogénu. To je nemožné bez použitia moderných molekulárno-biologických metód. Preto je diagnostika hepatitídy pomocou metódy polymerázovej reťazovej reakcie jedným z najdôležitejších krokov pri zisťovaní príčiny ochorenia a určovaní ďalšej taktiky liečby.

PCR v diagnostike infekcie HIV

V súčasnosti sa na laboratórnu diagnostiku HIV infekcie používa najdostupnejší a zároveň citlivý prístup - detekcia protilátok proti HIV v krvi pomocou enzýmovej imunoanalýzy (ELISA) - s následným potvrdením pozitívnych výsledkov testov. analýza pomocou imunoblotovania (IB). Účinnosť identifikácie ľudí infikovaných HIV pomocou tohto prístupu môže dosiahnuť 99 % alebo viac.

Ale sérologická diagnostika HIV infekcie má množstvo obmedzení:

1. Neefektívnosť počas obdobia tzv „sérologické okno“ (v prvých týždňoch po infekcii sa protilátky nedetegujú z dôvodu ich absencie alebo nízkej koncentrácie).
2. Protilátky proti HIV sa už dlho zisťujú u všetkých detí narodených matkám infikovaným HIV.
3. Falošne pozitívne výsledky ELISA sú spôsobené prítomnosťou protilátok proti antigénom podobným antigénom HIV v krvi.
4. Falošne negatívne a pochybné výsledky ELISA a imunoblottingu (najmä u pacientov v terminálnom štádiu ochorenia).

Preto sa v súčasnosti čoraz častejšie používajú testy PCR na skríning infekcie HIV. Podľa „Metodických odporúčaní pre testovanie na infekciu HIV“ (schválených Ministerstvom zdravotníctva a sociálneho rozvoja Ruskej federácie dňa 08.06.2007) „ak existujú epidemiologické kritériá naznačujúce nedávne riziko infekcie HIV pre pacientov a pri súčasne pravdepodobne falošne pozitívne alebo falošne negatívne výsledky napr. ELISA a IB. Pri vyšetrovaní detí narodených matkám infikovaným HIV alebo pacientov v období „séronegatívneho okna“ sa používa metóda PCR, ktorá zisťuje HIV. génový materiál...“ A v prípade už stanovenej diagnózy HIV infekcie sa PCR analýza používa na prognózu, dynamické pozorovanie a monitorovanie terapie.

• Vírus ľudskej imunodeficiencie, kvalitatívne stanovenie DNA provírusu, PCR
• Kvantitatívne stanovenie RNA vírusom ľudskej imunodeficiencie, PCR
• Komplexná diagnostika: kvalitatívne stanovenie RNA vírusu hepatitídy C/DNA vírusu hepatitídy B/vírusu ľudskej imunodeficiencie (HIV) RNA typu 1 a 2

V Centre molekulárnej diagnostiky (CMD) môžete anonymne absolvovať test PCR na HIV.

Prečo je HIV a AIDS také desivé, aké diagnostické metódy existujú. Podrobné informácie o štúdiách PCR.

Podľa štatistík, ktoré poskytla Svetová zdravotnícka organizácia spolu s organizáciou OSN UNAIDS, za posledných štyridsať rokov zomrelo na HIV a AIDS viac ako 25 miliónov pacientov. Nie nadarmo epidemiológovia nazvali HIV morom 20. storočia, keďže škody spôsobené ľudstvu touto infekciou sú obrovské. Najviac infikované boli krajiny afrického kontinentu. Infekcia tvrdo zasahuje ekonomiky už aj tak nestabilných štátov a ľudia sú v núdzi.

Keď sa objavia príznaky, rýchla diagnostika je mimoriadne dôležitá. infekcia tela infekciou HIV, pretože včasný priebeh liečby môže zachrániť alebo aspoň predĺžiť život pacienta. V súčasnosti sa technologický pokrok posunul ďaleko: boli vynájdené najnovšie metódy diagnostiky vírusu HIV a AIDS, liečba je dostupná každému človeku na planéte, spoľahlivosť testov sa vyznačuje malým stupňom chybovosti a terapia je vysoko účinný.

Diagnóza infekcie HIV

V našej krajine je identifikácia prítomnosti infekcie HIV v tele pacienta komplex analýz:

• Prepojený imunosorbentový test
• Imunitný blotting
• Polymerická reťazová reakcia
• Expresné testy

Enzýmová imunoanalýza.

Skríning (ELISA test) je počiatočná fáza určovania infekcie v tele. Je založený na proteínových zlúčeninách vírusu vytvorených v umelých podmienkach, ktoré identifikujú protilátky produkované imunitnými bunkami ako reakciu na infekciu. Deje sa chemická reakcia medzi činidlami, v dôsledku čoho indikátorový prvok mení farbu. To znamená, že výsledok testu je pozitívny. Informácie pomocou tejto metódy je možné získať do niekoľkých týždňov od okamihu infekcie. Táto metóda nezisťuje prítomnosť infekcie u pacienta, ale určuje protilátky produkované proti tejto infekcii. Stáva sa, že tvorba protilátok začína 10-15 dní po infekcii, ale v drvivej väčšine prípadov neskôr - po 1-1,5 mesiaci.

Informácie o takejto analýze sa spracúvajú dva až desať dní.

Spoľahlivosť diangózy pre HIV je podporená analýzou IB. Výhradne pozitívny test IB pre vírus môže slúžiť ako platný dôvod na tvrdenie infekcie.

Podstata analýzy:

Vzorka venóznej krvi sa odoberie na analýzu v laboratóriu. Vzorka sa dodatočne pripraví, proteínové zlúčeniny, ktoré sú v nej prítomné, sa elektrifikujú v testovacej komore a potom sa zodpovedajúcim spôsobom rozdelia v gélovej látke molekulovej hmotnosti. Do pripravenej vzorky sa niekoľkokrát vloží papierový pásik potiahnutý činidlom. Ak sú vo vzorke protilátky proti vírusu, dôjde k chemickej reakcii a na testovacom prúžku sa stanú viditeľné čiary. Keď sa objavia 2 alebo 3 čiarky p24, gp41 a gp120 alebo gp160, výsledok testu je pozitívny.

Ak sa z analýzy IB získa pozitívny výsledok s chybou jedného percenta, možno urobiť záver o prítomnosti infekcie HIV v tele.

Rýchle testy na HIV a AIDS

Najnovšie technológie na stanovenie vírusu imunodeficiencie v tele sú expresné metódy. Informácie o takejto analýze je možné získať do niekoľkých minút po dokončení. Najvyššiu spoľahlivosť majú imunochromografické testy – špeciálne testovacie prúžky, na ktorých povrch je nastriekaná vrstva činidla. Protilátky obsiahnuté v testovanom materiáli prichádzajú do kontaktu s činidlom a menia farbu indikátora. Po niekoľkých minútach sa objavia dva pruhy, čo naznačuje prítomnosť infekcie. Prítomnosť jednej línie znamená, že neexistuje žiadna infekcia.

Takýto test možno použiť ako doplnkový, informácie o takomto teste nevyhnutne potvrdzujú ďalšie štúdie.

Koľko stojí rýchly test na HIV?

Rýchly test na HIV bude stáť v priemere 200-1000 rubľov.

HIV PCR je jednou z najspoľahlivejších metód na stanovenie tejto diagnózy, ktorá je nebezpečná pre ľudské zdravie a život. Lekár môže odporučiť testovanie každej osobe, ktorá má dôvod na podozrenie na infekciu vírusom ľudskej imunodeficiencie. Pacienti sa často pýtajú, aká je podstata techniky a aké sú jej výhody a nevýhody.

Kedy a v akom časovom rámci by ste mali navštíviť nemocnicu, aby ste predložili biomateriál na výskum?

PCR je diagnostický prístup, ktorý sa v klinickej medicíne objavil vďaka molekulárnej biológii. Práve z tohto odvetvia vedy prišiel výskum do medicíny. A začalo sa aktívne používať na stanovenie rôznych diagnóz vrátane infekcie HIV.

Každý vie, že každý živý organizmus pozostáva z DNA a RNA. Polymerázová reťazová reakcia je založená na schopnosti týchto nukleových kyselín sa replikovať.

Je dôležité si uvedomiť, že PCR je schopná detegovať aj malé koncentrácie vírusových častíc v krvi. Je to spôsobené tým, že v biologickej tekutine cirkulujú „fragmenty“ nukleových kyselín, ktoré sú zachytené a rozpoznávané špeciálnym zariadením. To vám umožní urobiť správnu diagnózu, aj keď sa infekcia vyskytla veľmi nedávno.

A vírusové častice sa ešte nestihli rozmnožiť v tele pacienta. Biologický materiál získaný od pacienta sa umiestni do špeciálneho reaktora. Najčastejšie sa používa venózna krv.

Špeciálne komponenty, ktoré interagujú s vírusovými časticami, výrazne zvyšujú počet detekovaných fragmentov. V dôsledku toho sa fragmenty stanú identifikovateľnými, možno ich posúdiť a vyvodiť závery o infekcii.

Darujte krv zo žily podľa štandardnej metódy.

Pred návštevou lekára nejedzte, je lepšie prísť ráno. Ak pacient podstupuje imunostimulačný cyklus, musí sa prerušiť dva týždne pred testom.

Výhody a nevýhody techniky

Ako každá iná metóda diagnostiky konkrétneho ochorenia, testovanie PCR má množstvo výhod a nevýhod. Medzi výhody metódy patrí:

• nízka pravdepodobnosť, že sa stretnete s falošne negatívnym alebo falošne pozitívnym výsledkom;
• schopnosť používať na výskum nielen krv, ale aj iné biologické tekutiny, ako je vaginálny výtok, sperma atď. (ako však lekári poznamenávajú, presnosť sa môže znížiť);
• schopnosť použiť raz odobratý materiál na diagnostiku niekoľkých chorôb naraz;
• rýchlosť získavania výsledkov (ak je analýza naliehavá, výsledky sa dostanú hneď nasledujúci deň);
• schopnosť rýchlo diagnostikovať infekciu a podľa toho začať liečbu choroby, čím sa zlepší prognóza;
• žiadne vekové obmedzenia (odber krvi zo žily možno vykonať aj u novorodenca).

Prirodzene, PCR má aj nevýhody. Tie obsahujú:

• pomerne vysoká cena štúdie, najmä v porovnaní so základnými skríningovými metódami používanými vo väčšine nemocníc;
• potreba sofistikovaného vybavenia, ktoré je tiež drahé;
• stále existuje možnosť stretnúť sa s falošnými výsledkami, ak je porušená technológia analýzy, proces odberu krvi alebo osoba trpí autoimunitným, nádorovým alebo chronickým infekčným ochorením.

Prirodzene, testovanie PCR by sa malo vykonávať na odporúčanie lekára.

Lekár bude môcť v každom konkrétnom prípade posúdiť, aké spoľahlivé budú výsledky. Ak to lekár považuje za potrebné, odporučí pacientovi namiesto PCR inú diagnostickú metódu. Alebo po obdržaní výsledkov doplní diagnostický akčný plán o ďalšiu položku.

Mnohí pacienti sú znepokojení otázkou, či všetci ľudia podstupujú testovanie PCR na HIV. V skutočnosti nie je diagnóza potrebná pre každého. Sú však skupiny pacientov, ktorí občas musia darovať krv na rozbor.

• Predbežná diagnóza

• Pozitívny imunoglobulínový test

Imunoblotting, ktorý poskytuje pozitívny výsledok pre vírus ľudskej imunodeficiencie, je nevyhnutne potvrdený pomocou polymerázovej reťazovej reakcie. Urobte to isté, ak ste najskôr vykonali PCR. Vzájomné dopĺňanie štúdií takmer úplne eliminuje možnosť chýb.

• Kontrola terapie

Pacienti s potvrdeným HIV statusom pomerne pravidelne darujú krv na testovanie PCR. Je to potrebné na sledovanie priebehu liečby av prípade potreby na úpravu terapie.

• Hodnotenie bezpečnosti krvi

Každá darovaná krv musí byť testovaná pomocou polymerázovej reťazovej reakcie.

Tým sa eliminuje prenos infekcie HIV prostredníctvom krvnej transfúzie.

• Posúdenie stavu novorodenca

Ak sa dieťa narodí HIV pozitívnej žene, musí podstúpiť aj PCR. Je to potrebné na určenie stavu dieťaťa a rozvoj taktiky jeho ďalšieho riadenia.

Spoľahlivosť štúdie

Mnohí pacienti sa obávajú otázky, aká spoľahlivá je polymerázová reťazová reakcia, ak plánujú diagnostikovať vírus ľudskej imunodeficiencie. Napriek tomu, že PCR je jednou z najmodernejších metód, stále jej nemôžete na 100% dôverovať.

Dnes sa PCR stále nepoužíva ako skríningová metóda práve preto, že môže poskytnúť falošne pozitívne výsledky.

Aby sa tomu zabránilo, lekári odporúčajú správne sa pripraviť na odber biomateriálu, ale ani príprava nie vždy pomôže. Napríklad test môže poskytnúť pozitívny výsledok, ak má osoba v tele zhubný nádor. Ak nejakým trpí chronická infekcia alebo napríklad autoimunitný proces. Aj napriek možnosti získať falošne pozitívny výsledok sa PCR v praxi používa ako jedna z najspoľahlivejších metód.

Na odstránenie chýb lekári často odporúčajú svojim pacientom, aby si test zopakovali, ak je výsledok pozitívny. V niektorých prípadoch sa tiež odporúča dodatočne vykonať reakciu ELISA a ďalšie štúdie. Vykonanie súboru testov vždy poskytuje spoľahlivejší výsledok ako vykonanie iba jednej štúdie.

Na čo sa dá test použiť?

Nie všetci pacienti vedia, na čo presne sa polymerázová reťazová reakcia používa v klinickej praxi lekára.

• Je potrebné odhaliť ochorenie v latentnom období

Vírus imunodeficiencie môže v tele dlho existovať latentne.

PCR je jediný test, ktorý môže indikovať prítomnosť patogénu v tele. Aj keď vírusových častíc je stále veľmi málo.

• Stanovenie genotypu

Dnes bolo identifikovaných niekoľko genotypov infekcie HIV. Často je dôležité určiť, ktorý špecifický genotyp infikoval osobu, pretože od toho závisí výber antivírusových liekov.

• Stanovenie vírusu a nie protilátok proti nemu

Jednou z výhod analýzy je, že táto technika nedokáže detekovať protilátky proti vírusovým časticiam, ale samotný vírus.

Mnohých pacientov zaujíma, prečo je to výhoda. Ide o to, že ak sa kladie dôraz na detekciu samotného patogénu, znižuje sa pravdepodobnosť výskytu falošne pozitívnych reakcií v dôsledku podobnosti rôznych protilátok. Ako lekári poznamenávajú, v mnohých ohľadoch to bola schopnosť detegovať samotný vírus a nie protilátky, vďaka čomu bola technika taká účinná.

Kedy je termín?

Pacienti sa často zaujímajú o otázku, ako dlho trvá návšteva lekára na darovanie biologického materiálu.

Všetko závisí od toho, čo presne plánujete určiť pomocou techniky.

Ak existuje podozrenie na infekciu a je potrebná včasná diagnostika, odporúča sa vyhľadať DNA vírusu ľudskej imunodeficiencie. V priemere sa DNA v krvi začína zisťovať desať dní po infekcii. Odporúča sa však potvrdiť analýzu pomocou ELISA, najskôr po 4 týždňoch od infekcie a potom po 12 týždňoch.

Ak ELISA potvrdí diagnózu, stav pacienta sa považuje za pozitívny.

Výskum na určenie RNA je vždy kvantitatívny. Odporúča sa, ak sa potvrdí pozitívny stav pacienta a začne sa liečba antivírusovou liečbou. Ak je v tele veľa RNA, potom sa diagnostikuje akútna fáza ochorenia. Ak to nestačí, má sa za to, že potlačenie patogénu bolo úspešné a terapia sa môže zmeniť na šetrnejšiu.

• Hodnotenie odporu

Niektoré kmene HIV sú odolné voči liekom používaným na ich liečbu. Odporúča sa aj štúdia na posúdenie pravdepodobnosti neodpovedania na liečbu. Vykonáva sa, ak po predpísaní terapie nedôjde k zlepšeniu. Odporúča sa aj počas akútneho obdobia infekčného procesu.

Vírus ľudskej imunodeficiencie sa každým rokom rozširuje v celej ľudskej populácii. S patológiou sa môže stretnúť každý, a preto je niekedy životne dôležité vedieť, ako stanoviť správnu diagnózu.

PCR – dobrá metóda diagnózu, ak ju lekár správne použije. A hlavnou vecou pre pacienta je dodržiavať odporúčania lekára na prípravu na štúdiu, ktoré nie sú zložité.

Odporúčame prečítať

Kancelárske programy

Industriálna spoločnosť – aké sú jej nevýhody a výhody?

Pokyny pre Android

Koľko rokov vládol Kaddáfí?

Pokyny pre Android

Átman - najvyššie „ja“ Definície, významy slov v iných slovníkoch

Smartfóny

Rádioaktívne premeny atómových jadier Rádioaktívne premeny atómových jadier stručne fyzika

Kancelárske programy

Informácie a informačné procesy

Tablety

Magické nástroje a predmety