Come ci ingannano con la diagnostica PCR per l'HIV. Ricerca PCR: diagnosi moderna dell'HIV, AIDS Diagnosi PCR dell'infezione da HIV

Che siamo stati ingannati dall’HIV/AIDS per 30 anni lo è fatto medico, che ormai da tempo non ha più bisogno di alcuna prova. Non voglio offendere nessuno, ma la verità è che al momento, avendo davanti a me tutte le informazioni disponibili sul punto di vista alternativo, presentato cioè dai dissidenti dell'HIV, è semplicemente impossibile continuare e ingenuamente credere in una teoria dell’HIV/AIDS creata artificialmente e imposta con l’aiuto della propaganda cinica e ingannevole.

Se hai espresso il tuo sconcerto sul fatto che i test diagnostici per l'HIV non rilevano il virus stesso, ma solo gli anticorpi contro di esso, e questo vale non solo per il test immunoassorbente legato a un enzima, ma anche per l'immunoblotting, che è considerato più accurato, allora probabilmente hai sentito le assicurazioni di medici o di persone esperte che esiste un metodo di reazione a catena della polimerasi che non ha nulla a che fare con gli anticorpi, ma rileva direttamente il virus stesso.
Hai sentito parlare del metodo diagnostico PCR e in particolare dell'infezione da HIV? Di sicuro. Hai provato ad approfondire un po' la questione e a capirlo? NO? Quindi è chiaro che ci stiamo prendendo in giro? Bene. Ma ora lo mostrerò chiaramente, sulle mie dita...

Sì, siamo davvero palesemente e cinicamente ingannati quando ci assicurano che il test PCR per l'HIV determina la presenza del virus stesso o la sua concentrazione nel sangue, cioè la carica virale. E dirò subito che sotto questo aspetto il metodo PCR non solo non è diverso da ELISA e IB, ma si può dire che si basa direttamente esattamente sullo stesso principio.
Cosa significa? Permettetemi di ricordarvi che i test diagnostici HIV ELISA e Immunoblot si basano sulla reazione degli anticorpi presenti nel campione in esame con gli antigeni virali inseriti nel test stesso. Cosa c'è nei sistemi di test come queste proteine ​​dell'HIV - solo Dio lo sa, e probabilmente non tutto. Di conseguenza, non è del tutto chiaro quali anticorpi reagiscano con queste presunte proteine ​​dell’HIV, risultando in un elenco di 62 elementi di malattie e condizioni che causano una reazione falsa positiva.

Qual è la base del metodo della reazione a catena della polimerasi e come viene diagnosticata la malattia infettiva? In caso di epatite e HIV viene esaminato il sangue del paziente. Per stabilire la presenza di uno specifico patogeno nel campione di sangue in studio, per l'analisi PCR si utilizza un primer, cioè un frammento di DNA del patogeno stesso, complementare ad una specifica sezione del suo DNA, cioè, in sostanza, il il primer è attaccato a una sezione di DNA nello stesso modo in cui le sezioni sono collegate tra loro a doppia elica del DNA.
Lo capisci? Ti viene prelevato il sangue, poi gli viene aggiunto qualcosa che presumibilmente è senza dubbio una parte unica del genoma del virus dell'HIV, vengono aggiunti altri ingredienti necessari, quindi il tutto viene riscaldato e raffreddato trenta volte, e il risultato è voilà! sei sieropositivo! la tua carica virale è di 3 milioni! inizia subito la terapia!

Ma aspetta. Non vedi come sei stato ingannato fin dall'inizio?
Ti è stato assicurato che il metodo PCR rileva il virus stesso. Ma questa è una bugia assoluta! Il metodo PCR a questo proposito non è diverso da ELISA e IB! Proprio come nei sistemi di test vengono utilizzate cose sconosciute sotto le spoglie di antigeni dell'HIV, così nei test PCR, sotto le spoglie di primer spacciati per parte del DNA dell'HIV stesso, viene utilizzata allo stesso modo una sostanza completamente sconosciuta. Capisci che se l'HIV non esiste, allora non si può parlare di HIV DNA, o HIV RNA, o anticorpi contro l'HIV, in particolare anticorpi materni, con cui ci ingannano dicendoci che tutti i bambini di madri sieropositive , e scompaiono da soli nel secondo anno di vita...

Come questo.
- Il metodo PCR rileva il virus HIV stesso, qui non possono esserci errori o dubbi! E questo metodo molto accurato mostra la carica virale, che è molto importante per monitorare la dinamica della malattia e il suo trattamento!
- Bene, bene... Stai parlando del virus stesso? Cosa viene utilizzato come primer? Lo stesso virus? Lo stesso che Montagnier e Gallo scoprirono 30 anni fa? Lo hanno trovato davvero? Davvero ripulito? Hai davvero fatto una foto? È stato davvero dimostrato che utilizza i linfociti T per la replicazione/riproduzione, con il risultato che il loro numero totale si esaurisce e si verifica una pericolosa immunodeficienza? E' tutto vero?

E in sostanza, il metodo PCR nell'AIDS viene utilizzato non tanto grazie al suo inventore Kary Mullis (anzi, addirittura contrariamente alla sua opinione!), ma grazie a Montagna e Gallo, che hanno tirato fuori l'HIV dal nulla, e i cui primer del DNA sono utilizzati nella diagnostica PCR dell'HIV...

Quindi eccolo qui. Se ti è stato detto che, in base ai risultati del test PCR, sei sieropositivo e hai una carica virale elevata, oppure stiamo parlando di tuo figlio, non preoccuparti neanche per un secondo! sei stato palesemente ingannato! L'inventore del metodo della reazione a catena della polimerasi, il microbiologo Kary Mullis, è un dissidente dell'HIV ed è categoricamente contrario all'uso della PCR nella diagnosi dell'HIV, perché capisce bene che nel caso di un virus HIV inesistente, questo è semplicemente un palese inganno cinico...

Ancora un momento. Hai sentito parlare di carica virale non rilevabile? Il fatto è che non tutte le persone sieropositive, quando vengono testate la quantità di virus nel sangue, ottengono un determinato risultato che, a seconda del valore, è considerato una carica virale bassa o alta. Se di queste persone ce ne fossero pochissime, non si parlerebbe affatto di loro. Ma il fatto è che apparentemente ce ne sono molti, ed è per questo che si parla di carica virale non rilevabile nell'infezione da HIV. Non menzionerò la terapia PR che presumibilmente riduce le VL a non rilevabili. No, il nocciolo della questione è che senza alcuna terapia in molte persone non viene rilevato. Mai.
Cioè, al paziente viene diagnosticata l'infezione da HIV, ma con l'aiuto del famoso cosmico supersensibile metodo esatto La diagnostica PCR non è in grado di rilevare il virus HIV nel suo corpo. Come mai?

And then we are told that the method is, of course, unique, but modern technical means still impose limitations, and the mostaaaaaaaaaaaatime cannot be detected with PCR diagnostics.

Cioè, il paziente ha senza dubbio l'HIV. Il virus è incurabile, indistruttibile, astuto, insidioso, dannoso, estremamente intelligente e inventivo. E nemmeno il metodo super magico della PCR è in grado di scoprire dove si nasconde l'astuto virus agli scienziati e ai medici.
Si scopre che, da un lato, ci dicono cos'è un metodo PCR meraviglioso e altamente accurato, può indovinare un intero elefante e persino una balena da una molecola - e dall'altro, con gli occhi abbassati, borbottano indistintamente sulla carica virale non rilevabile in migliaia di pazienti che convivono da decenni con una diagnosi di infezione da HIV e non assumono trattamenti antiretrovirali.

Così è andata. Ci ingannano come vogliono. Non siate idioti senza paura. Non fidarti della parola di nessun medico o scienziato. Ti diranno tre volte sette volte dell'accuratezza cosmica dei test PCR, ma solo un'osservazione sui primer HIV utilizzati in questo caso riduce istantaneamente l'intero magnifico quadro in mille pezzi. Perché per gioco possiamo dire che così come Gallo brevettò il primo test HIV quando scoprì un falso virus HIV, allo stesso modo avrebbe potuto brevettare i primer HIV per la diagnostica PCR dell'infezione da HIV, perché i primer sono essenzialmente la stessa cosa, che l'HIV gli antigeni sono alcune sostanze biologiche specifiche inerenti solo a questo virus (frammenti di genoma o proteine ​​specifiche)...

La PCR per l'HIV è uno dei metodi più informativi di diagnosi genetica molecolare. Questo metodo aiuta a identificare vari tipi di disturbi e malattie infettive ereditarie nel paziente. Lo stesso metodo diagnostico è applicabile nel caso di test sul biomateriale per la presenza dell’HIV, una malattia grave che si sviluppa durante tutta la vita del paziente. CON cure mediche La PCR era tra i test raccomandati eseguiti a pagamento in caso di sospetto virus dell'immunodeficienza umana. Tuttavia, l’attendibilità dello studio è giustificata solo in 80 casi su 100.

La diagnosi PCR per l'HIV sta per reazione a catena della polimerasi. Per questo tipo di ricerca usano Vari tipi materiali biologici. Tra questi c'è il sangue, inoltre può essere utilizzata la secrezione della vagina del paziente o del liquido seminale negli uomini.

Attenzione! La saliva non viene utilizzata per la PCR nella diagnosi dell’HIV. Questo approccio è considerato inefficace, poiché gli anticorpi dell'HIV sono presenti in una concentrazione minima in questo materiale. Lo stesso vale per l'urina, il sudore e le lacrime.

L'indicazione per lo studio descritto è un ELISA doppio positivo (saggio immunoassorbente legato all'enzima). Incarichi alternativi verranno discussi in seguito.

Dettagli sull'essenza dell'analisi

Il test PCR per l'HIV si basa sulla capacità dell'acido nucleico di riprodursi in modo indipendente. Le cellule viventi sono costituite da proteine ​​e dagli stessi acidi, in altre parole, RNA e DNA. Le molecole agiscono come guardiani del codice genetico.
Con una bassa concentrazione di particelle virali (HIV) nel biomateriale, il campione non include intere catene di DNA (acido desossiribonucleico), ma solo i loro componenti, chiamati nucleotidi. L'analisi consente di rilevare anche piccoli resti di cellule virali. È questo fatto che spiega la capacità della PCR di dimostrare risultati fasi iniziali– poche settimane dopo l’infezione da HIV.

I migliori risultati della reazione a catena della polimerasi possono essere ottenuti esaminando il sangue venoso. Il campione viene digerito utilizzando l'attrezzatura. Le frazioni vengono poi sottoposte a trattamento enzimatico. Le sostanze reattive si combinano con le particelle di DNA virale per duplicarlo. Il numero di tali elementi aumenta secondo il principio della catena fino a quando la loro presenza (non anticorpi) nel sangue del paziente diventa evidente ai tecnici di laboratorio. Nessuno di loro funziona esattamente secondo lo stesso principio. metodi esistenti diagnostica

Componenti della reazione

Utilizzando il metodo PCR, puoi scoprire in anticipo lo sviluppo del virus nel corpo. Perché non può essere definita popolare nel campo della medicina gratuita e praticata ovunque? Il fatto è che un test HIV di questo tipo è molto costoso e richiede i seguenti componenti:

• una matrice di acido desossiribonucleico comprendente un segmento di DNA destinato all'amplificazione;
• due primer (per ciascun segmento di catena);
• un componente della polimerasi chimicamente attivo per accelerare la polimerizzazione delle particelle virali;
• trifosfati desossiribonucleosidici;
• particelle di magnesio bivalente (cariche);
• soluzione speciale per la creazione condizioni favorevoli, fornendo il giusto livello di acidità, concentrazione di sale e numero di particelle di magnesio nel liquido.

Attenzione! Per proteggere il campione dal surriscaldamento, al materiale viene aggiunta una piccola quantità di vaselina, che contiene grassi e, di conseguenza, alta temperatura bollente.

Il tasso di precisione relativamente elevato dell'analisi è spiegato dalla sua maggiore sensibilità, che stimola una reazione agli anticorpi contro altri virus.

Vantaggi e svantaggi della tecnica PCR per l'HIV

Per valutare oggettivamente il metodo, presentiamo nella tabella seguente una serie di vantaggi e svantaggi dello studio:

Ovviamente, ci sono più vantaggi della tecnica. Se valutiamo il tipo di diagnosi dal punto di vista della produttività di ulteriori trattamenti e della possibilità di prolungare la vita del paziente, la PCR è la via più sicura verso il successo.

Caratteristiche dell'analisi

La caratteristica principale dell'analisi descritta è la sua capacità di diagnosticare precocemente l'HIV, cosa di cui altri metodi di ricerca non sono in grado. Quanti giorni dopo la sospetta infezione posso donare il sangue per la PCR? In genere questo periodo di tempo è di 10-14 giorni. Nelle successive 24 ore, il paziente riceve il risultato. Eventuali deviazioni nelle scadenze sono spiegate dalle condizioni operative individuali dei centri diagnostici e delle cliniche.

Scopo dello studio

La PCR viene eseguita principalmente per rilevare l'HIV (sindrome da immunodeficienza umana). Tuttavia, il test può essere effettuato anche se si sospetta lo sviluppo di malattie sessualmente trasmissibili. Lo stesso metodo è applicabile nel caso della diagnosi di malattie ereditarie.

Diagnostica PDR: ragioni per effettuarla

Quando donare il sangue per la PCR? Nella maggior parte dei casi, il materiale biologico viene donato quando il virus dell’immunodeficienza umana si è adattato alle condizioni dell’organismo, ha stimolato la produzione di anticorpi e ha causato i primi sintomi dell’HIV. Tuttavia, ciò è giustificato solo se è trascorso un periodo di tempo sufficiente dopo l'infezione e richiede l'ELISA.

La necessità della PCR nasce su iniziativa del paziente che desidera diagnosticare tempestivamente la malattia (se presente). La ragione potrebbe essere: rapporti sessuali non protetti, contatto con materiale biologico di una persona infetta, recente trasfusione di sangue, ecc.

A chi viene prescritta la PCR?

La determinazione dell'infezione da HIV mediante PCR, su raccomandazione di uno specialista, viene effettuata nei seguenti casi:

• diagnosi preliminare. La PCR conferma o smentisce accuratamente il risultato ELISA;
• l'immunoblotting ha confermato la diagnosi. L'immunoblotting è un ulteriore modo per studiare l'AIDS . Entrambi i metodi vengono utilizzati insieme, il che elimina la possibilità di diagnosi errate;
• con stato di HIV confermato mediante la PCR si monitora l'effetto del trattamento scelto;
• per l'analisi del sangue dei donatori per la presenza di anticorpi HIV;
• per determinare lo stato HIV di un neonato quando la madre risulta positiva. La PCR nei primi giorni di vita consente di determinare l'infezione intrauterina o l'infezione del bambino durante il passaggio attraverso il canale del parto. Il test viene eseguito 2-3 settimane dopo la nascita.

Quanto tempo ci vuole per fare un test PCR e dove può essere fatto?

L'analisi PCR dell'HIV viene eseguita in un laboratorio speciale. Il test stesso e l'interpretazione del risultato non richiedono molto tempo: un mese o addirittura una settimana. Sono necessari fino a 6 minuti per prelevare il sangue. In un caso normale, uno specialista non avrà bisogno di più di un giorno per fare una diagnosi e giungere ad una conclusione. Le prime 8 ore vengono dedicate allo studio del sangue, il tempo rimanente viene dedicato alla registrazione. Il risultato può essere raccolto il giorno successivo al prelievo del campione. La durata del test rapido è di 2 ore.

Attenzione! La polizza di assicurazione medica obbligatoria permette di sostenere il test gratuitamente agenzia governativa assistenza sanitaria.

Quasi tutti i laboratori commerciali sono in grado di condurre ricerche, e in modo anonimo. Alla persona viene assegnato un numero speciale, al quale vengono poi collegati i risultati. Queste informazioni vengono caricate sul sito web dell'istituzione all'indirizzo Area personale utente.

Quanto costa fare un test PCR?

Questo metodo di conduzione della ricerca è piuttosto costoso. Ciò è dovuto al fatto che la PCR deve essere eseguita con le più moderne apparecchiature mediche; la manipolazione richiede che gli specialisti abbiano una conoscenza sufficiente.

La domanda urgente è: quanto costa a una persona sottoporsi a un test PCR per l’HIV? Ciò richiederà circa $ 56-60.

Effettuare analisi

Il test PCR per l’HIV prevede:

• prelievo di sangue per ricerca;
• raccolta aggiuntiva di sperma di un uomo e secrezioni genitali di una donna.

Attenzione! Di conseguenza, il test consente ai medici di determinare un’elevata carica virale per monitorare le condizioni del paziente.

Altre caratteristiche di questo test HIV che dovrebbero essere prese in considerazione:

• un paio di giorni prima del test, il paziente deve ridurre la quantità di cibi grassi nella dieta;
• Il sangue viene prelevato a stomaco vuoto;
• Gli enzimi che sintetizzano varie infezioni vengono aggiunti ai materiali biologici scissi in uno speciale reattore;
• l'analisi viene effettuata in più fasi, poiché la divisione delle molecole avviene secondo una progressione aritmetica. Programma speciale confronta un gran numero di strutture cellulari per rilevare l'HIV.

I metodi diagnostici accurati, che includono la PCR, sono costosi, ma sono in grado di rilevare l’HIV nelle fasi iniziali. Nel trattamento di tali patologie la cosa più importante è una diagnosi corretta e tempestiva, in grado di migliorare la qualità della vita di una persona e la sua durata.

Descrizione

La reazione a catena della polimerasi (PCR) è stata inventata nel 1983 dal biochimico americano Carey B. Mullis. Nel 1993 gli fu assegnato il Premio Nobel per questa scoperta.

Oggi gli ambiti di applicazione della PCR sono: metodo moderno biologia molecolare sono estremamente ampi. La diagnostica PCR occupa un posto speciale in pratica medica. E il motivo è molto semplice: la reazione a catena della polimerasi rende possibile l’impossibile.

La diagnostica PCR è spesso descritta in senso figurato come un metodo mediante il quale è possibile trovare un ago in un pagliaio e quindi costruire un pagliaio con questi aghi. L'"ago" è un minuscolo frammento del materiale genetico di una cellula (DNA o RNA).

Pertanto, la scoperta di questo metodo è uno degli eventi più notevoli nel campo della biologia molecolare degli ultimi decenni. Lo sviluppo del metodo PCR ha consentito alla diagnostica medica in generale di raggiungere un livello qualitativamente nuovo.

Nozioni di base sulla PCR

La base del metodo è la ripetuta copia selettiva (amplificazione) di una determinata sezione del DNA al fine di ottenere una quantità di materiale genetico tale che sarà sufficiente per il rilevamento visivo. In questo caso, solo una determinata sezione di DNA viene copiata (amplificata) più volte, a condizione che sia presente nel biomateriale in studio.

Inoltre la ricerca, oltre ad aumentare semplicemente il numero di copie delle sezioni di DNA, consente altre manipolazioni con materiale genetico. Pertanto, il metodo è ampiamente utilizzato nella ricerca scientifica, nella pratica biologica e medica: nella diagnosi di malattie infettive ed ereditarie, nell'identificazione di mutazioni, nella genotipizzazione, nella determinazione della paternità, nell'identificazione personale, ecc.

La PCR nella diagnosi delle malattie infettive

Oggi, la diagnostica PCR delle infezioni è una delle tecniche cliniche più accurate, sensibili ed efficaci metodi di laboratorio. Inoltre, la gamma degli agenti patogeni rilevati è praticamente illimitata: verrebbe sviluppato un sistema di test per l'analisi PCR dell'agente patogeno desiderato.

Grazie alla sua elevata sensibilità, la PCR consente di identificare l'agente patogeno anche con il suo contenuto minimo (ovvero, nel biomateriale studiato sono presenti solo poche molecole del suo DNA).

La PCR rileva gli agenti patogeni di malattie infettive quando ciò non può essere fatto con altri metodi (immunologici, culturali, microscopici). Pertanto, per numerosi agenti infettivi, il metodo della reazione a catena della polimerasi è diventato il “gold standard”; è collaudato nel tempo e clinicamente testato. Nella moderna diagnostica di laboratorio delle malattie infettive, la PCR è il metodo più sensibile e specifico per la rilevazione diretta degli agenti patogeni. Ciò consente non solo di stabilire l'eziologia della malattia, ma anche di monitorare il decorso del processo infettivo e valutare l'efficacia del trattamento.

L'analisi delle malattie sessualmente trasmissibili con il metodo PCR è particolarmente rilevante nel decorso asintomatico del processo infettivo causato da microrganismi incondizionatamente patogeni (Clamidia, determinazione qualitativa del DNA; Micoplasma, determinazione qualitativa del DNA; Agente gonorrea, determinazione qualitativa del DNA; Agente tricomonosi, determinazione qualitativa del DNA) . Ad esempio, con la gonorrea cronica nelle donne, anche utilizzando il metodo batteriologico, spesso non è possibile identificare il gonococco, nonostante i sintomi esistenti di un processo infiammatorio cronico nella cervice o nell'uretra.

La moderna diagnostica PCR consente non solo di identificare il materiale genetico degli agenti infettivi, ma anche di determinarne le concentrazioni di DNA/RNA (formato di ricerca quantitativa). La determinazione del numero di agenti patogeni è importante per decidere il trattamento, soprattutto se vengono identificati microrganismi opportunisti (micoplasma, determinazione quantitativa del DNA; tipizzazione dell'ureaplasma, determinazione quantitativa del DNA).

Una delle direzioni principali nello sviluppo del metodo PCR è il formato “Multiprime” sviluppato presso CMD, che consente di rilevare diversi agenti patogeni in una provetta (e una reazione).

• Patogeni delle infezioni trasmesse dalle zecche ixodid

Diagnostica PCR dell'epatite

Attualmente sono noti almeno 5 virus la cui capacità di causare danni al fegato è stata dimostrata. Questi sono gli agenti causali dell'epatite A, B, C, D, E. In rari casi, l'epatite può essere causata dai virus Epstein-Barr e herpes simplex. Oggi non tutti riconoscono la capacità di agenti come i virus TT e dell'epatite G di infettare il fegato. Tutti questi virus appartengono a famiglie diverse, hanno proprietà biologiche diverse e, di conseguenza, anche le tattiche di trattamento differiranno in modo significativo a seconda dell'eziologia dell'epatite.

Tenendo conto di quanto sopra, un problema molto urgente è l'adeguata diagnosi eziologica dell'epatite virale con l'identificazione di un agente patogeno specifico. Ciò è impossibile senza l'uso dei moderni metodi biologici molecolari. Pertanto, la diagnosi dell'epatite utilizzando il metodo della reazione a catena della polimerasi è uno dei passaggi più importanti per stabilire la causa della malattia e determinare ulteriori tattiche di trattamento.

La PCR nella diagnosi dell'infezione da HIV

Attualmente, per la diagnosi di laboratorio dell'infezione da HIV, viene utilizzato l'approccio più accessibile e allo stesso tempo sensibile - rilevamento degli anticorpi anti-HIV nel sangue mediante un test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) - seguito dalla conferma dei risultati positivi del test analisi mediante immunoblotting (IB). L’efficienza nell’identificazione delle persone infette dall’HIV utilizzando questo approccio può raggiungere il 99% o più.

Ma la diagnosi sierologica dell’infezione da HIV presenta una serie di limitazioni:

1. Inefficienza nel cosiddetto periodo “finestra sierologica” (nelle prime settimane dopo l’infezione gli anticorpi non vengono rilevati a causa della loro assenza o bassa concentrazione).
2. Gli anticorpi contro l'HIV sono stati rilevati da molto tempo in tutti i bambini nati da madri infette da HIV.
3. Risultati ELISA falsi positivi dovuti alla presenza nel sangue di anticorpi contro antigeni simili agli antigeni dell'HIV.
4. Risultati falsi negativi e discutibili dell'ELISA e dell'immunoblotting (soprattutto nei pazienti nella fase terminale della malattia).

Pertanto, i test PCR per lo screening dell’infezione da HIV sono oggi sempre più utilizzati. Secondo le “Raccomandazioni metodologiche per i test per l'infezione da HIV” (approvate dal Ministero della Salute e dello Sviluppo Sociale della Federazione Russa l'08/06/2007) “se esistono criteri epidemiologici che indicano un recente rischio di infezione da HIV per i pazienti e allo stesso tempo risultati presumibilmente falsi positivi o falsi negativi in ​​ELISA e IB, ad esempio. Quando si esaminano bambini nati da madri infette da HIV o pazienti durante il periodo della "finestra sieronegativa", viene utilizzato il metodo PCR, che rileva l'HIV materiale genetico...” E nel caso di una diagnosi già accertata di infezione da HIV, l'analisi PCR viene utilizzata per la prognosi, l'osservazione dinamica e il monitoraggio della terapia.

• Virus dell'immunodeficienza umana, determinazione qualitativa del DNA del provirus, PCR
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• Diagnostica completa: determinazione qualitativa dell'RNA del virus dell'epatite C/DNA del virus dell'epatite B/RNA del virus dell'immunodeficienza umana (HIV) di tipo 1 e 2

Presso il Centro di Diagnostica Molecolare (CMD), puoi fare un test PCR per l'HIV in modo anonimo.

Perché l'HIV e l'AIDS fanno così paura, quali metodi diagnostici esistono. Informazioni approfondite sugli studi PCR.

Secondo le statistiche fornite dall'Organizzazione Mondiale della Sanità in collaborazione con l'organizzazione delle Nazioni Unite UNAAIDS, negli ultimi quarant'anni più di 25 milioni di pazienti sono morti di HIV e AIDS. Non per niente gli epidemiologi hanno soprannominato l’HIV la piaga del XX secolo, poiché il danno causato da questa infezione all’umanità è colossale. I paesi del continente africano sono stati i più gravemente infettati. L’infezione sta colpendo duramente le economie di stati già instabili e le persone sono indigenti.

Quando compaiono i sintomi, la diagnosi tempestiva è estremamente importante. infezione del corpo con infezione da HIV, perché un ciclo terapeutico tempestivo può salvare o almeno aumentare la vita del paziente. Al giorno d'oggi, il progresso tecnologico ha fatto molta strada: sono stati inventati i metodi più recenti per diagnosticare il virus dell'HIV e dell'AIDS, il trattamento è disponibile per qualsiasi persona sul pianeta, l'affidabilità dei test è caratterizzata da un piccolo grado di errore e la terapia è altamente efficace.

Diagnosi di infezione da HIV

Nel nostro Paese identificare la presenza dell’infezione da HIV nel corpo di un paziente lo è complesso di analisi:

• Saggio immunoassorbente collegato
• Blotting immunitario
• Reazione a catena della polimerasi
• Test espressi

Test immunoenzimatico.

Screening (test ELISA)è la fase iniziale di determinazione dell'infezione nel corpo. Si basa su composti proteici del virus formati in condizioni artificiali, che identificano gli anticorpi prodotti dalle cellule immunitarie come reazione all’infezione. Sta accadendo reazione chimica tra i reagenti, a seguito della quale l'elemento indicatore cambia colore. Ciò significa che il risultato del test è positivo. Le informazioni utilizzando questo metodo possono essere ottenute entro un paio di settimane dal momento dell'infezione. Questo metodo non rileva la presenza di infezione nel paziente, ma determina gli anticorpi prodotti contro questa infezione. Succede che la produzione di anticorpi inizia 10-15 giorni dopo l'infezione, ma nella stragrande maggioranza dei casi più tardi, dopo 1-1,5 mesi.

Le informazioni su tale analisi vengono elaborate da due a dieci giorni.

L'affidabilità della diagnosi per l'HIV è supportata dall'analisi IB. Esclusivamente prova positiva L'IB del virus può servire come motivo valido per affermare l'infezione.

L'essenza dell'analisi:

Viene prelevato un campione di sangue venoso per l'analisi in laboratorio. Il campione viene ulteriormente preparato, i composti proteici in esso presenti vengono elettrizzati nella camera di prova, quindi distribuiti di conseguenza nella sostanza gel peso molecolare. Una striscia di carta rivestita con il reagente viene inserita più volte nel campione preparato. Se nel campione sono presenti anticorpi contro il virus, si verifica una reazione chimica e sulla striscia reattiva diventano visibili delle linee. Quando compaiono 2 o 3 trattini di p24, gp41 e gp120 o gp160, il risultato del test è positivo.

Se dall'analisi IB si ottiene un risultato positivo, con un errore dell'1%, si può trarre una conclusione sulla presenza dell'infezione da HIV nel corpo.

Test rapidi per HIV e AIDS

Le ultime tecnologie per determinare il virus dell'immunodeficienza nel corpo sono metodi espressi. Le informazioni su tale analisi possono essere ottenute entro pochi minuti dal completamento. La massima affidabilità si trova nei test immunocromagrafici: speciali strisce reattive sulla cui superficie viene spruzzato uno strato di reagente. Gli anticorpi contenuti nel materiale del test entrano in contatto con il reagente, cambiando il colore dell'indicatore. Dopo pochi minuti compaiono due strisce che indicano la presenza di infezione. La presenza di una singola linea significa che non c'è infezione.

Tale test può essere utilizzato come test aggiuntivo; le informazioni su tale test sono necessariamente confermate da altri studi.

Quanto costa un test rapido per l'HIV?

Un test rapido per l'HIV costerà in media 200-1000 rubli.

La PCR per l'HIV è uno dei metodi più affidabili per effettuare questa diagnosi, pericolosa per la salute e la vita umana. Un medico può raccomandare il test a chiunque abbia motivo di sospettare un’infezione da virus dell’immunodeficienza umana. I pazienti spesso si chiedono quale sia l'essenza della tecnica e quali siano i suoi vantaggi e svantaggi.

Quando e in quale arco di tempo dovresti recarti in ospedale per presentare il biomateriale per la ricerca?

La PCR è un approccio diagnostico apparso nella medicina clinica grazie alla biologia molecolare. È da questo ramo della scienza che la ricerca è arrivata alla medicina. E cominciò ad essere utilizzato attivamente per fare varie diagnosi, inclusa l'infezione da HIV.

Tutti sanno che qualsiasi organismo vivente è costituito da DNA e RNA. La reazione a catena della polimerasi si basa sulla capacità di questi acidi nucleici di autoreplicarsi.

È importante ricordare che la PCR è in grado di rilevare anche piccole concentrazioni di particelle virali nel sangue. Ciò accade perché nel fluido biologico circolano “frammenti” di acidi nucleici, che vengono catturati e riconosciuti da apposite apparecchiature. Ciò consente di effettuare una diagnosi corretta anche se l'infezione è avvenuta da molto tempo.

E le particelle virali non hanno ancora avuto il tempo di moltiplicarsi nel corpo del paziente. Il materiale biologico ottenuto dal paziente viene posto in un reattore speciale. Il sangue venoso viene spesso utilizzato.

Componenti speciali, che interagiscono con le particelle virali, aumentano notevolmente il numero di frammenti rilevati. In questo modo i frammenti diventano identificabili, possono essere valutati e si possono trarre conclusioni sull'infezione.

Dona il sangue da una vena secondo il metodo standard.

Non mangiare prima della visita dal medico, è meglio venire la mattina. Se il paziente è sottoposto a un ciclo di immunostimolazione, questo dovrà essere interrotto due settimane prima del test.

Pro e contro della tecnica

Come qualsiasi altro metodo per diagnosticare una particolare malattia, il test PCR presenta numerosi vantaggi e svantaggi. I vantaggi del metodo includono:

• bassa probabilità di riscontrare un risultato falso negativo o falso positivo;
• la capacità di utilizzare non solo il sangue per la ricerca, ma anche altri fluidi biologici, come perdite vaginali, sperma, ecc. (tuttavia, come notano i medici, la precisione potrebbe diminuire);
• la capacità di utilizzare materiale una volta prelevato per diagnosticare più malattie contemporaneamente;
• velocità nell'ottenimento dei risultati (se l'analisi è urgente, i risultati vengono ricevuti il ​​giorno successivo);
• la capacità di diagnosticare rapidamente un'infezione e, di conseguenza, iniziare il trattamento della malattia, migliorando così la prognosi;
• nessun limite di età (il prelievo di sangue da una vena può essere effettuato anche su un neonato).

Naturalmente la PCR presenta anche degli svantaggi. Questi includono:

• il prezzo piuttosto elevato dello studio, soprattutto se paragonato ai metodi di screening di base utilizzati nella maggior parte degli ospedali;
• la necessità di attrezzature sofisticate e costose;
• esiste ancora la possibilità di ottenere risultati falsi se la tecnologia di analisi, il processo di prelievo del sangue è interrotto o se la persona soffre di una malattia autoimmune, tumorale o infettiva cronica.

Naturalmente, il test PCR dovrebbe essere eseguito su raccomandazione di un medico.

Il medico sarà in grado di valutare in ogni caso specifico quanto saranno affidabili i risultati. Se il medico lo ritiene necessario, consiglierà al paziente un altro metodo diagnostico invece della PCR. Oppure, dopo aver ricevuto i risultati, integrerà il piano d'azione diagnostico con un elemento aggiuntivo.

Molti pazienti sono preoccupati per la questione se tutte le persone siano sottoposte al test PCR per l’HIV. In effetti, la diagnosi non è necessaria per tutti. Tuttavia, ci sono gruppi di pazienti che occasionalmente devono donare il sangue per le analisi.

• Diagnosi preliminare

• Test immunoglobulinico positivo

L'immunoblotting che produce un risultato positivo per il virus dell'immunodeficienza umana è necessariamente confermato mediante la reazione a catena della polimerasi. Fare lo stesso se è stata eseguita prima la PCR. Completare gli studi degli altri elimina quasi completamente la possibilità di errori.

• Controllo della terapia

I pazienti con stato confermato di HIV donano abbastanza regolarmente il sangue per il test PCR. Ciò è necessario per monitorare l’andamento del trattamento e, se necessario, adattare la terapia.

• Valutazione della sicurezza del sangue

Qualsiasi sangue donato deve essere testato utilizzando la reazione a catena della polimerasi.

Ciò elimina la trasmissione dell’infezione da HIV attraverso la trasfusione di sangue.

• Valutazione dello stato neonatale

Se un bambino nasce da una donna sieropositiva, deve sottoporsi anche alla PCR. Ciò è necessario per determinare lo status del bambino e sviluppare tattiche per la sua ulteriore gestione.

Affidabilità dello studio

Molti pazienti sono preoccupati per la questione dell'affidabilità della reazione a catena della polimerasi se intendono diagnosticare il virus dell'immunodeficienza umana. Nonostante la PCR sia uno dei metodi più moderni, non puoi ancora fidarti al 100%.

Oggi la PCR non viene ancora utilizzata come metodo di screening proprio perché può dare risultati falsi positivi.

Per evitare ciò, i medici consigliano di prepararsi adeguatamente alla raccolta del biomateriale, ma anche la preparazione non sempre aiuta. Ad esempio, il test può dare un risultato positivo se una persona ha un tumore maligno nel corpo. Se ne soffre infezione cronica o, ad esempio, un processo autoimmune. Nonostante la possibilità di ottenere un risultato falso positivo, la PCR viene utilizzata nella pratica come uno dei metodi più affidabili.

Per eliminare gli errori, i medici spesso raccomandano ai loro pazienti di ripetere il test se il risultato è positivo. Inoltre, in alcuni casi, si consiglia di effettuare inoltre una reazione ELISA e altri studi. L'esecuzione di una serie di test fornisce sempre un risultato più affidabile rispetto all'esecuzione di un solo studio.

A cosa può servire il test?

Non tutti i pazienti sanno a cosa serve esattamente la reazione a catena della polimerasi nella pratica clinica del medico.

• È necessario rilevare la malattia nel periodo di latenza

Il virus dell’immunodeficienza può esistere latente nel corpo per molto tempo.

La PCR è l'unico test in grado di indicare la presenza di un agente patogeno nel corpo. Anche se le particelle virali sono ancora pochissime.

• Determinazione del genotipo

Oggi sono stati identificati diversi genotipi di infezione da HIV. Spesso è importante determinare quale genotipo specifico ha infettato una persona, poiché la scelta dei farmaci antivirali dipende da questo.

• Determinazione del virus e non degli anticorpi contro di esso

Uno dei vantaggi dell'analisi è che la tecnica può rilevare non gli anticorpi contro le particelle virali, ma il virus stesso.

Molti pazienti sono interessati al motivo per cui questo rappresenta un vantaggio. Il punto è che se l’accento è posto sulla rilevazione dell’agente patogeno stesso, la probabilità di incontrare reazioni false positive dovute alla somiglianza di anticorpi diversi si riduce. Come notano i medici, per molti versi è stata la capacità di rilevare il virus stesso, e non gli anticorpi, a rendere la tecnica così efficace.

Quando è dovuto?

I pazienti sono spesso interessati alla domanda su quanto tempo occorre per visitare un medico per donare materiale biologico.

Tutto dipende da cosa intendi determinare esattamente utilizzando la tecnica.

Si raccomanda di ricercare il DNA del virus dell'immunodeficienza umana se si sospetta un'infezione ed è necessaria una diagnosi precoce. In media, il DNA nel sangue inizia a essere rilevato dieci giorni dopo che si è verificata l'infezione. Si consiglia tuttavia di confermare l'analisi mediante ELISA, prima dopo 4 settimane dall'infezione e poi dopo 12 settimane.

Se l'ELISA conferma la diagnosi, lo stato del paziente è considerato positivo.

La ricerca per determinare l’RNA è sempre quantitativa. Si consiglia nel caso in cui venga confermata la positività del paziente e si inizi il trattamento con terapia antivirale. Se c'è molto RNA nel corpo, viene diagnosticata la fase acuta della malattia. Se ciò non bastasse, si ritiene che la soppressione dell'agente patogeno abbia avuto successo e la terapia può essere modificata con una più delicata.

• Valutazione della resistenza

Alcuni ceppi di HIV sono resistenti ai farmaci usati per curarli. Si raccomanda inoltre uno studio per valutare la probabilità di mancata risposta al trattamento. Viene eseguito se non si riscontra alcun miglioramento dopo la prescrizione della terapia. È consigliato anche durante il periodo acuto del processo infettivo.

Ogni anno il virus dell’immunodeficienza umana si diffonde sempre più in tutta la popolazione umana. Qualsiasi persona può incontrare una patologia e quindi a volte è fondamentale sapere come fare una diagnosi corretta.

PCR – buon metodo diagnosi se utilizzato correttamente da un medico. E la cosa principale per il paziente è seguire le raccomandazioni del medico per la preparazione allo studio, che non sono complicate.

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