Bagaimana mereka membodohi kita dengan diagnosis PCR untuk HIV. Penelitian PCR - diagnosis modern HIV, diagnosis PCR AIDS untuk infeksi HIV

Kita telah tertipu oleh HIV/AIDS selama 30 tahun fakta medis, yang tidak lagi memerlukan bukti apa pun untuk waktu yang lama. Saya tidak ingin menyinggung siapa pun, tetapi kenyataannya adalah bahwa saat ini, dengan semua informasi yang tersedia tentang sudut pandang alternatif, yang disajikan oleh para pembangkang HIV, adalah mustahil untuk melanjutkan dan secara naif. percaya pada teori HIV/AIDS yang diciptakan dan dipaksakan secara artifisial dengan bantuan propaganda yang sinis dan menipu.

Jika Anda mengungkapkan kebingungan Anda tentang fakta bahwa tes diagnostik untuk HIV tidak mendeteksi virus itu sendiri, tetapi hanya antibodi terhadap virus tersebut, dan ini tidak hanya berlaku untuk uji imunosorben terkait-enzim, tetapi juga untuk imunoblotting, yang dianggap lebih akurat, maka Anda mungkin pernah mendengar jaminan dari dokter atau orang yang berpengetahuan bahwa ada metode reaksi berantai polimerase yang tidak ada hubungannya dengan antibodi, tetapi langsung mendeteksi virus itu sendiri.
Pernahkah Anda mendengar tentang metode diagnostik PCR, khususnya infeksi HIV? Untuk ya. Sudahkah Anda mencoba menyelidikinya sedikit dan mencari tahu? TIDAK? Jadi jelas kita sedang dibodohi? Bagus. Tapi sekarang saya akan menunjukkannya dengan jelas, dengan jari saya...

Ya, kita benar-benar tertipu secara terang-terangan dan sinis ketika mereka meyakinkan kita bahwa tes PCR untuk HIV menentukan keberadaan virus itu sendiri atau konsentrasinya di dalam darah, yaitu viral load. Dan saya akan segera mengatakan bahwa dalam hal ini metode PCR tidak hanya tidak berbeda dengan ELISA dan IB, tetapi dapat dikatakan bahwa metode ini secara langsung didasarkan pada prinsip yang persis sama.
Apa artinya? Izinkan saya mengingatkan Anda bahwa tes diagnostik HIV ELISA dan Immunoblot didasarkan pada reaksi antibodi dalam sampel tes dengan antigen virus yang ditempatkan dalam tes itu sendiri. Apa yang ada dalam sistem pengujian protein HIV ini - hanya Tuhan yang tahu, dan mungkin tidak semuanya. Oleh karena itu, masih belum jelas antibodi mana yang bereaksi dengan protein HIV ini, sehingga menghasilkan daftar 62 item penyakit dan kondisi yang menyebabkan reaksi positif palsu.

Apa dasar dari metode reaksi berantai polimerase, dan bagaimana cara mendiagnosis penyakit menular? Dalam kasus hepatitis dan HIV, darah pasien diperiksa. Untuk menentukan keberadaan patogen tertentu dalam sampel darah yang diteliti, primer digunakan untuk pengujian PCR, yaitu fragmen DNA dari patogen itu sendiri, yang melengkapi bagian tertentu dari DNA-nya, yaitu, pada dasarnya, primer dilekatkan pada suatu bagian DNA dengan cara yang sama seperti bagian-bagian tersebut dihubungkan satu sama lain dengan heliks ganda DNA.
Apa kau mengerti? Darah Anda diambil, kemudian sesuatu ditambahkan ke dalamnya yang tidak diragukan lagi merupakan bagian unik dari genom virus HIV, bahan-bahan lain yang diperlukan ditambahkan, lalu semuanya dipanaskan dan didinginkan tiga puluh kali, dan hasilnya adalah voila! kamu HIV positif! viral load Anda 3 juta! segera mulai terapi!

Tapi tunggu. Tidak bisakah kamu melihat betapa kamu telah dibodohi sejak awal?
Anda yakin bahwa metode PCR mendeteksi virus itu sendiri. Tapi ini benar-benar bohong! Metode PCR dalam hal ini tidak berbeda dengan ELISA dan IB! Sama seperti hal-hal yang tidak diketahui digunakan dalam sistem pengujian dengan kedok antigen HIV, demikian pula dalam tes PCR, dengan kedok primer yang diturunkan sebagai bagian dari DNA HIV itu sendiri, zat yang sama sekali tidak diketahui digunakan dengan cara yang sama. Anda memahami bahwa jika HIV tidak ada, maka tidak akan ada pembicaraan tentang DNA HIV, atau RNA HIV, atau antibodi terhadap HIV, khususnya antibodi ibu, yang mana mereka membodohi kita dengan mengatakan bahwa semua anak dari ibu yang HIV-positif , dan menghilang dengan sendirinya di tahun kedua kehidupan...

Seperti ini.
- Metode PCR mendeteksi virus HIV itu sendiri, tidak ada kesalahan atau keraguan di sini! Dan metode paling akurat ini menunjukkan viral load, yang sangat penting untuk memantau dinamika penyakit dan pengobatannya!
- Baiklah... Apakah yang Anda bicarakan tentang virus itu sendiri? Apa yang digunakan sebagai primer? Virus yang sama? Yang sama yang ditemukan Montagnier dan Gallo 30 tahun lalu? Apakah mereka benar-benar menemukannya? Benar-benar dibersihkan? Apakah Anda benar-benar mengambil foto? Apakah benar-benar terbukti menggunakan limfosit T untuk replikasi/reproduksi, akibatnya jumlah totalnya berkurang dan terjadi defisiensi imun yang berbahaya? Apakah ini semua benar?

Dan intinya, metode PCR pada AIDS digunakan bukan berkat penemunya Kary Mullis (bahkan bertentangan dengan pendapatnya!), melainkan berkat Montagna dan Gallo, yang mengeluarkan HIV dari udara, dan yang DNA primernya digunakan dalam diagnosis PCR HIV...

Jadi begini. Jika Anda diberitahu bahwa berdasarkan hasil tes PCR, Anda positif HIV dan memiliki viral load yang tinggi, atau kita berbicara tentang anak Anda, jangan khawatir! kamu terang-terangan ditipu! Penemu metode reaksi berantai polimerase, ahli mikrobiologi Kary Mullis, adalah seorang pembangkang HIV, dan dia dengan tegas menentang penggunaan PCR dalam diagnosis HIV, karena dia memahami dengan baik bahwa dalam kasus virus HIV yang tidak ada, hal ini hanyalah penipuan sinis yang terang-terangan...

Satu saat lagi. Pernahkah Anda mendengar tentang viral load tidak terdeteksi? Faktanya tidak semua orang HIV-positif, ketika dites jumlah virus dalam darahnya, mendapatkan hasil tertentu, yang tergantung nilainya, dianggap viral load rendah atau tinggi. Jika jumlah orang seperti itu sangat sedikit, mereka tidak akan dibicarakan sama sekali. Namun faktanya ternyata jumlahnya banyak, dan itulah sebabnya mereka berbicara tentang viral load yang tidak terdeteksi pada infeksi HIV. Saya tidak akan menyebutkan terapi PR yang konon menurunkan VL hingga tidak terdeteksi. Tidak, faktanya adalah tanpa terapi apa pun, penyakit ini tidak terdeteksi pada banyak orang. Tidak pernah.
Artinya, pasien didiagnosis terinfeksi HIV, tetapi dengan bantuan kosmik supersensitif yang terkenal metode yang tepat Diagnostik PCR tidak dapat mendeteksi virus HIV di tubuhnya. Bagaimana?

Dan kemudian kita diberitahu bahwa metode ini, tentu saja, unik, tetapi sarana teknis modern masih memberikan batasan, dan waktu yang paling lama tidak dapat dideteksi dengan diagnostik PCR.

Artinya, pasien tersebut dipastikan mengidap HIV. Virus ini tidak dapat disembuhkan, tidak dapat dihancurkan, licik, berbahaya, jahat, sangat cerdas dan inventif. Dan bahkan metode PCR super ajaib pun tidak mampu mendeteksi di mana virus licik itu bersembunyi dari para ilmuwan dan dokter.
Ternyata, di satu sisi, mereka memberi tahu kita betapa hebat dan sangat akuratnya metode PCR, metode ini dapat menebak seluruh gajah dan bahkan seekor paus dari satu molekul - dan di sisi lain, dengan mata terkulai, mereka bergumam secara tidak jelas tentang viral load tidak terdeteksi pada ribuan pasien yang telah hidup selama puluhan tahun dengan diagnosis infeksi HIV dan tidak memakai pengobatan antiretroviral.

Begitu seterusnya. Mereka membodohi kita sesuka mereka. Jangan menjadi idiot yang tidak takut. Jangan percaya pada perkataan dokter atau ilmuwan mana pun. Mereka akan memberi tahu Anda tiga kali tujuh kali tentang keakuratan kosmik tes PCR, tetapi hanya satu komentar tentang primer HIV yang digunakan dalam kasus ini akan langsung menghancurkan keseluruhan gambaran yang luar biasa itu hingga berkeping-keping. Karena untuk bersenang-senang kita dapat mengatakan bahwa sama seperti Gallo mematenkan tes HIV pertama ketika ia menemukan virus HIV palsu, dengan cara yang sama ia dapat mematenkan primer HIV untuk diagnosis PCR dari infeksi HIV, karena primer pada dasarnya adalah hal yang sama, yaitu HIV. antigen adalah beberapa zat biologis spesifik yang hanya melekat pada virus ini (fragmen genom atau protein spesifik)..

PCR HIV adalah salah satu metode diagnosis genetik molekuler yang paling informatif. Cara ini membantu mengidentifikasi berbagai macam penyakit menular dan penyakit keturunan pada pasien. Metode diagnostik yang sama dapat diterapkan dalam kasus pengujian biomaterial untuk mengetahui adanya HIV, penyakit serius yang berkembang sepanjang hidup pasien. DENGAN perawatan medis PCR merupakan salah satu tes yang direkomendasikan dan dilakukan secara berbayar dalam kasus dugaan human immunodeficiency virus. Namun, keandalan penelitian ini hanya dapat dibenarkan pada 80 dari 100 kasus.

Diagnostik PCR untuk HIV adalah singkatan dari reaksi berantai polimerase. Untuk jenis penelitian ini mereka menggunakan Berbagai jenis bahan biologis. Diantaranya darah, selain itu bisa digunakan sekret dari vagina pasien atau cairan mani pada pria.

Perhatian! Air liur tidak digunakan untuk PCR dalam mendiagnosis HIV. Pendekatan ini dianggap tidak efektif, karena antibodi terhadap HIV berada pada konsentrasi minimal dalam bahan ini. Hal yang sama berlaku untuk urin, keringat, dan air mata.

Indikasi untuk penelitian yang dijelaskan adalah ELISA positif ganda (enzyme-linked immunosorbent assay). Tugas alternatif akan dibahas nanti.

Detail tentang inti analisis


Tes PCR untuk HIV didasarkan pada kemampuan asam nukleat untuk bereproduksi secara mandiri. Sel hidup terdiri dari protein dan asam yang sama, dengan kata lain, RNA dan DNA. Molekul bertindak sebagai penjaga kode genetik.
Dengan konsentrasi partikel virus (HIV) yang rendah dalam biomaterial, sampel tidak mencakup seluruh rantai DNA (asam deoksiribonukleat), tetapi hanya komponennya, yang disebut nukleotida. Analisis ini memungkinkan Anda mendeteksi sisa-sisa kecil sel virus. Fakta inilah yang menjelaskan kemampuan PCR untuk menunjukkan hasil tahap awal– beberapa minggu setelah infeksi HIV.

Hasil terbaik dari reaksi berantai polimerase dapat diharapkan saat memeriksa darah vena. Sampel dicerna menggunakan peralatan. Fraksi tersebut kemudian mengalami perlakuan enzimatik. Zat reaktif bergabung dengan partikel DNA virus untuk menggandakannya. Jumlah unsur-unsur tersebut meningkat sesuai dengan prinsip rantai sampai keberadaan unsur-unsur tersebut (bukan antibodi) dalam darah pasien dapat diketahui oleh teknisi laboratorium. Tak satu pun dari mereka bekerja dengan prinsip yang persis sama. metode yang ada diagnostik


Komponen reaksi

Dengan menggunakan metode PCR, Anda bisa mengetahui terlebih dahulu perkembangan virus di dalam tubuh. Mengapa tidak bisa disebut populer dalam bidang pengobatan gratis dan dilakukan dimana-mana? Faktanya, tes HIV semacam itu sangat mahal dan memerlukan komponen-komponen berikut:

  • matriks asam deoksiribonukleat termasuk segmen DNA yang dimaksudkan untuk amplifikasi;
  • dua primer (untuk setiap segmen rantai);
  • komponen polimerase yang aktif secara kimia untuk mempercepat polimerisasi partikel virus;
  • deoksiribonukleosida trifosfat;
  • partikel magnesium divalen (bermuatan);
  • solusi khusus untuk membuat kondisi yang menguntungkan, memberikan tingkat keasaman, konsentrasi garam, dan jumlah partikel magnesium yang tepat dalam cairan.

Perhatian! Untuk melindungi sampel dari panas berlebih, sejumlah kecil Vaseline ditambahkan ke bahan, yang mengandung lemak dan, karenanya, suhu tinggi mendidih.

Tingkat akurasi analisis yang relatif tinggi disebabkan oleh peningkatan sensitivitasnya, yang merangsang reaksi antibodi terhadap virus lain.

Kelebihan dan kekurangan teknik PCR untuk HIV

Untuk mengevaluasi metode ini secara objektif, kami sajikan dalam tabel di bawah ini sejumlah kelebihan dan kekurangan penelitian ini:

pro Minus
– tingkat akurasi yang cukup tinggi (mendeteksi virus pada 80% kasus)

– keserbagunaan (untuk penelitian mereka tidak hanya menggunakan darah, tetapi juga cairan vagina dan sperma)

– berbagai metode (satu sampel bahan biologis dapat diuji untuk beberapa penyakit)

– kecepatan memperoleh hasil (pasien menerima jawaban keesokan harinya – metode cepat lebih efisien dalam hal ini)

– sensitivitas tinggi (diagnosis mungkin dilakukan pada tahap awal perkembangan HIV, yang tidak dapat dikatakan tentang ELISA atau analisis umum darah untuk infeksi)

- ketidakhadiran batasan usia(tes darah HIV ini dapat dilakukan pada anak sejak ia dilahirkan)

- harga tinggi

– kebutuhan untuk menggunakan peralatan berteknologi tinggi

– 20% hasil positif palsu (karena sensitivitas metode yang tinggi)

Tentu saja, ada lebih banyak keuntungan dari teknik ini. Jika kita mengevaluasi jenis diagnosis dari sudut pandang produktivitas pengobatan lebih lanjut dan kemungkinan memperpanjang hidup pasien, PCR adalah jalan paling pasti menuju kesuksesan.

Fitur analisis


Fitur utama dari analisis yang dijelaskan adalah kemampuannya untuk mendiagnosis HIV secara dini, yang tidak mampu dilakukan oleh metode penelitian lain. Berapa hari setelah dugaan infeksi saya dapat mendonorkan darah untuk PCR? Biasanya jangka waktu ini adalah 10-14 hari. Selama 24 jam berikutnya, pasien menerima hasilnya. Kemungkinan penyimpangan dalam tenggat waktu dijelaskan oleh kondisi operasi individu dari pusat diagnostik dan klinik.

Tujuan penelitian

PCR banyak dilakukan untuk mendeteksi HIV (human immunodeficiency syndrome). Namun, tes ini juga bisa dilakukan jika Anda mencurigai adanya perkembangan penyakit menular seksual. Metode yang sama juga berlaku dalam kasus diagnosis penyakit keturunan.

Diagnostik PDR: alasan untuk melakukan

Kapan sebaiknya Anda mendonorkan darah untuk PCR? Dalam kebanyakan kasus, bahan biologis disumbangkan ketika human immunodeficiency virus telah beradaptasi dengan kondisi tubuh, merangsang produksi antibodi dan menyebabkan gejala pertama HIV. Namun, hal ini dibenarkan hanya jika waktu yang cukup telah berlalu setelah infeksi dan memerlukan ELISA.

Kebutuhan PCR muncul atas inisiatif pasien yang ingin segera mendiagnosis penyakitnya (jika ada). Alasannya mungkin: hubungan seksual tanpa kondom, kontak dengan bahan biologis orang yang terinfeksi, transfusi darah baru-baru ini, dll.

Siapa yang diresepkan PCR?

Penentuan infeksi HIV menggunakan PCR, atas rekomendasi dokter spesialis, dilakukan dalam kasus berikut:

  • diagnosis awal. PCR secara akurat menegaskan atau menyangkal hasil ELISA;
  • immunoblotting mengkonfirmasi diagnosis tersebut. Immune blotting adalah cara tambahan untuk mempelajari AIDS . Kedua metode tersebut digunakan bersamaan, sehingga menghilangkan kemungkinan kesalahan diagnosis;
  • dengan status HIV terkonfirmasi menggunakan PCR, efek pengobatan yang dipilih dipantau;
  • untuk analisis darah donor untuk adanya antibodi terhadap HIV;
  • untuk menentukan status HIV bayi baru lahir ketika hasil tes ibu positif. PCR pada hari-hari pertama kehidupan memungkinkan untuk mengetahui infeksi intrauterin atau infeksi pada bayi saat melewati jalan lahir. Tes ini dilakukan 2-3 minggu setelah kelahiran.

Berapa lama waktu tes PCR dan di mana bisa dilakukan?

Analisis HIV PCR dilakukan di laboratorium khusus. Tes itu sendiri dan interpretasi hasilnya tidak memerlukan banyak waktu: sebulan atau bahkan seminggu. Diperlukan waktu hingga 6 menit untuk mengambil darah. Dalam kasus normal, seorang spesialis memerlukan waktu tidak lebih dari satu hari untuk membuat diagnosis dan mengeluarkan kesimpulan. 8 jam pertama dihabiskan untuk mempelajari darah, sisanya dihabiskan untuk registrasi. Hasilnya dapat diambil keesokan harinya setelah sampel diambil. Durasi pengujian ekspres adalah 2 jam.

Perhatian! Polis asuransi kesehatan wajib memungkinkan untuk mengikuti tes secara gratis agen pemerintah kesehatan.

Hampir semua laboratorium komersial mampu melakukan penelitian, dan secara anonim. Orang tersebut diberi nomor khusus, yang kemudian dihubungkan dengan hasilnya. Informasi ini diunggah ke situs institusi di Wilayah Pribadi pengguna.

Berapa biaya tes PCR?

Metode melakukan penelitian ini cukup mahal. Pasalnya, PCR harus dilakukan dengan peralatan medis terkini, manipulasi memerlukan dokter spesialis yang memiliki pengetahuan yang cukup.

Pertanyaan mendesaknya adalah: berapa biaya seseorang untuk melakukan tes PCR untuk HIV? Ini akan membutuhkan sekitar $56-60.

Melakukan analisis

Tes PCR untuk HIV melibatkan:

  • pengambilan sampel darah untuk penelitian;
  • pengumpulan tambahan sperma dari pria dan cairan genital dari wanita.

Perhatian! Hasilnya, tes ini memungkinkan dokter menentukan viral load yang tinggi untuk memantau kondisi pasien.

Ciri-ciri lain dari tes HIV ini yang harus diperhatikan:

  • beberapa hari sebelum tes, pasien harus mengurangi jumlah makanan berlemak dalam makanannya;
  • Darah diambil saat perut kosong;
  • Enzim yang mensintesis berbagai infeksi ditambahkan ke bahan biologis yang dipecah dalam reaktor khusus;
  • analisis dilakukan dalam beberapa tahap, karena pembelahan molekul terjadi secara deret aritmatika. Program khusus membandingkan sejumlah besar struktur seluler untuk mendeteksi HIV.

Metode diagnostik yang akurat, termasuk PCR, mahal, namun mampu mendeteksi HIV pada tahap awal. Dalam pengobatan patologi semacam itu, hal terpenting adalah diagnosis yang benar dan tepat waktu, yang dapat meningkatkan kualitas hidup dan durasi hidup seseorang.

Keterangan

Reaksi berantai polimerase (PCR) ditemukan pada tahun 1983 oleh ahli biokimia Amerika Carey B. Mullis. Pada tahun 1993, ia dianugerahi Hadiah Nobel untuk penemuan ini.

Saat ini bidang penerapan PCR adalah: metode modern biologi molekuler sangatlah luas. Diagnostik PCR menempati tempat khusus di praktek medis. Dan alasannya cukup sederhana: reaksi berantai polimerase membuat hal yang tidak mungkin menjadi mungkin.

Diagnostik PCR sering kali secara kiasan digambarkan sebagai metode di mana Anda dapat menemukan jarum di tumpukan jerami dan kemudian membuat tumpukan jerami dari jarum tersebut. "Jarum" adalah bagian kecil dari materi genetik sel (DNA atau RNA).

Dengan demikian, penemuan metode ini merupakan salah satu peristiwa paling luar biasa di bidang biologi molekuler dalam beberapa dekade terakhir. Perkembangan metode PCR telah memungkinkan diagnosa medis secara umum naik ke tingkat yang baru secara kualitatif.

Dasar-dasar PCR

Dasar dari metode ini adalah penyalinan selektif berulang (amplifikasi) pada bagian DNA tertentu untuk memperoleh sejumlah materi genetik yang cukup untuk deteksi visual. Dalam hal ini, hanya bagian DNA tertentu yang disalin (diperkuat) berkali-kali, asalkan DNA tersebut ada dalam biomaterial yang diteliti.

Selain itu, penelitian ini, selain hanya meningkatkan jumlah salinan bagian DNA, juga memungkinkan dilakukannya manipulasi lain dengan materi genetik. Oleh karena itu, metode ini banyak digunakan dalam penelitian ilmiah, praktik biologi dan medis: dalam diagnosis penyakit menular dan keturunan, dalam mengidentifikasi mutasi, genotipe, menetapkan ayah, identifikasi pribadi, dll.

PCR dalam diagnosis penyakit menular

Saat ini, diagnosis infeksi PCR adalah salah satu diagnosis klinis yang paling akurat, sensitif dan efektif metode laboratorium. Selain itu, jangkauan patogen yang terdeteksi praktis tidak terbatas - sistem pengujian untuk analisis PCR terhadap patogen yang diinginkan akan dikembangkan.

Karena sensitivitasnya yang tinggi, PCR memungkinkan Anda mengidentifikasi patogen meskipun kandungannya minimal (yaitu, hanya beberapa molekul DNA yang terdapat dalam biomaterial yang diteliti).

PCR mendeteksi patogen penyakit menular bila tidak dapat dilakukan dengan metode lain (imunologis, kultural, mikroskopis). Oleh karena itu, untuk sejumlah agen infeksi, metode reaksi berantai polimerase telah menjadi “standar emas”; metode ini telah teruji oleh waktu dan teruji secara klinis. Dalam diagnostik laboratorium modern penyakit menular, PCR adalah metode paling sensitif dan spesifik untuk mendeteksi patogen secara langsung. Hal ini memungkinkan tidak hanya untuk menetapkan etiologi penyakit, tetapi juga untuk memantau jalannya proses infeksi dan mengevaluasi efektivitas pengobatan.

Pengujian IMS menggunakan metode PCR sangat relevan dalam proses infeksi tanpa gejala yang disebabkan oleh mikroorganisme patogen tanpa syarat (Klamidia, penentuan DNA kualitatif; Mikoplasma, penentuan DNA kualitatif; Agen Gonore, penentuan DNA kualitatif; Agen Trichomonosis, penentuan DNA kualitatif) . Misalnya, pada gonore kronis pada wanita, bahkan dengan menggunakan metode bakteriologis, seringkali gonokokus tidak dapat dideteksi, meskipun terdapat gejala proses inflamasi kronis pada serviks atau uretra.

Diagnostik PCR modern memungkinkan tidak hanya untuk mengidentifikasi materi genetik agen infeksi, tetapi juga untuk menentukan konsentrasi DNA/RNA (format penelitian kuantitatif). Penentuan jumlah patogen penting dalam menentukan pengobatan, terutama jika mikroorganisme oportunistik teridentifikasi (Mycoplasma, penentuan kuantitatif DNA; Pengetikan Ureaplasma, penentuan kuantitatif DNA).

Salah satu arah utama dalam pengembangan metode PCR adalah format “Multiprime” yang dikembangkan di CMD, yang memungkinkan untuk mendeteksi beberapa patogen dalam satu tabung reaksi (dan satu reaksi).

  • Patogen infeksi yang ditularkan oleh kutu ixodid

Diagnostik PCR hepatitis

Saat ini, setidaknya diketahui ada 5 virus yang terbukti mampu menyebabkan kerusakan hati. Ini adalah agen penyebab hepatitis A, B, C, D, E. Dalam kasus yang jarang terjadi, hepatitis dapat disebabkan oleh virus Epstein-Barr dan virus herpes simpleks. Kemampuan agen seperti virus TT dan hepatitis G untuk menginfeksi hati tidak diketahui oleh semua orang saat ini. Semua virus ini berasal dari keluarga yang berbeda, memiliki sifat biologis yang berbeda dan, oleh karena itu, taktik pengobatan juga akan berbeda secara signifikan tergantung pada etiologi hepatitis.

Mengingat hal di atas, masalah yang sangat mendesak adalah diagnosis etiologi virus hepatitis yang memadai dengan identifikasi patogen tertentu. Hal ini tidak mungkin terjadi tanpa menggunakan metode biologi molekuler modern. Oleh karena itu, diagnosis hepatitis dengan metode reaksi berantai polimerase merupakan salah satu langkah terpenting dalam menentukan penyebab penyakit dan menentukan taktik pengobatan lebih lanjut.

PCR dalam diagnosis infeksi HIV

Saat ini, untuk diagnosis laboratorium infeksi HIV, pendekatan yang paling mudah diakses dan sekaligus sensitif digunakan - deteksi antibodi terhadap HIV dalam darah menggunakan enzim-linked immunosorbent assay (ELISA) - diikuti dengan konfirmasi hasil positif dari tes tersebut. analisis menggunakan immunoblotting (IB). Efisiensi mengidentifikasi orang yang terinfeksi HIV dengan menggunakan pendekatan ini dapat mencapai 99% atau lebih.

Namun diagnosis serologis infeksi HIV memiliki sejumlah keterbatasan:

  1. Inefisiensi selama periode yang disebut “jendela serologis” (pada minggu-minggu pertama setelah infeksi, antibodi tidak terdeteksi karena tidak adanya atau konsentrasinya rendah).
  2. Antibodi terhadap HIV telah lama terdeteksi pada semua anak yang lahir dari ibu yang terinfeksi HIV.
  3. Hasil ELISA positif palsu karena adanya antibodi terhadap antigen yang mirip dengan antigen HIV dalam darah.
  4. Hasil ELISA dan immunoblotting negatif palsu dan dipertanyakan (terutama pada pasien penyakit stadium terminal).

Oleh karena itu, tes PCR untuk skrining infeksi HIV kini semakin banyak digunakan. Menurut “Rekomendasi metodologis untuk pengujian infeksi HIV” (disetujui oleh Kementerian Kesehatan dan Pembangunan Sosial Federasi Rusia pada 06/08/2007) “jika terdapat kriteria epidemiologis yang menunjukkan risiko infeksi HIV baru-baru ini pada pasien dan di pada saat yang sama, kemungkinan hasil positif palsu atau negatif palsu pada ELISA dan IB, misalnya, Saat memeriksa anak yang lahir dari ibu yang terinfeksi HIV, atau pasien dalam periode “jendela seronegatif”, metode PCR digunakan, yang mendeteksi HIV materi gen…” Dan dalam kasus diagnosis infeksi HIV yang sudah ditegakkan, analisis PCR digunakan untuk prognosis, observasi dinamis dan pemantauan terapi.

  • Human immunodeficiency virus, penentuan kualitatif DNA provirus, PCR
  • Penentuan kuantitatif RNA, PCR
  • Diagnostik komprehensif: penentuan kualitatif RNA virus hepatitis C/DNA virus hepatitis B/RNA human immunodeficiency virus (HIV) tipe 1 dan 2

Di Pusat Diagnostik Molekuler (CMD), Anda dapat melakukan tes PCR untuk HIV secara anonim.

Mengapa HIV dan AIDS begitu menakutkan, metode diagnostik apa yang ada. Informasi mendalam tentang studi PCR.

Menurut statistik yang diberikan oleh Organisasi Kesehatan Dunia bersama dengan organisasi PBB UNAIDS, selama empat puluh tahun terakhir, lebih dari 25 juta pasien telah meninggal karena HIV dan AIDS. Bukan tanpa alasan para ahli epidemiologi menjuluki HIV sebagai wabah abad ke-20, karena kerugian yang ditimbulkan oleh infeksi ini terhadap umat manusia sangat besar. Negara-negara di benua Afrika adalah negara yang paling banyak terinfeksi. Infeksi ini sangat memukul perekonomian negara-negara yang sudah tidak stabil, dan masyarakatnya berada dalam kemiskinan.

Ketika gejala muncul, diagnosis yang cepat sangatlah penting. infeksi tubuh dengan infeksi HIV, karena terapi yang tepat waktu dapat menyelamatkan atau setidaknya meningkatkan kehidupan pasien. Saat ini, kemajuan teknologi telah berkembang pesat: metode terbaru untuk mendiagnosis virus HIV dan AIDS telah ditemukan, pengobatan tersedia untuk siapa saja di planet ini, keandalan tes ditandai dengan tingkat kesalahan yang kecil, dan terapi tidak dapat dilakukan. sangat efektif.

Diagnosis infeksi HIV

Di negara kita, mengidentifikasi keberadaan infeksi HIV di tubuh pasien adalah hal yang penting kompleks analisis:

  • Uji imunosorben terkait
  • Penghapusan kekebalan tubuh
  • Reaksi berantai polimerase
  • Tes ekspres

Uji imunoenzim.

Penyaringan (tes ELISA) merupakan tahap awal penentuan infeksi pada tubuh. Hal ini didasarkan pada senyawa protein virus yang terbentuk dalam kondisi buatan, yang mengidentifikasi antibodi yang diproduksi oleh sel kekebalan sebagai reaksi terhadap infeksi. Kejadian reaksi kimia antar reagen, akibatnya elemen indikator berubah warna. Artinya hasil tesnya positif. Informasi dengan menggunakan metode ini dapat diperoleh dalam beberapa minggu sejak saat infeksi. Metode ini tidak mendeteksi adanya infeksi pada pasien, tetapi menentukan antibodi yang dihasilkan terhadap infeksi tersebut. Kebetulan produksi antibodi dimulai 10-15 hari setelah infeksi, tetapi pada sebagian besar kasus kemudian - setelah 1-1,5 bulan.

Informasi berdasarkan analisis tersebut diproses dari dua hingga sepuluh hari.

Keandalan diangosis HIV didukung oleh analisis IB. Khusus tes positif IB untuk virus dapat menjadi alasan yang sah untuk menyatakan adanya infeksi.

Inti dari analisis:

Sampel darah vena diambil untuk dianalisis di laboratorium. Sampel juga disiapkan, senyawa protein yang ada di dalamnya dialiri arus listrik di ruang pengujian, kemudian didistribusikan dalam zat gel sesuai kebutuhan. berat molekul. Potongan kertas yang dilapisi reagen ditempatkan beberapa kali ke dalam sampel yang telah disiapkan. Jika terdapat antibodi terhadap virus dalam sampel, reaksi kimia akan terjadi dan garis akan terlihat pada strip tes. Jika muncul 2 atau 3 garis p24, gp41, dan gp120 atau gp160, hasil tesnya positif.

Jika diperoleh hasil positif dari analisis IB, dengan error satu persen, dapat diambil kesimpulan tentang adanya infeksi HIV di dalam tubuh.

Tes cepat HIV dan AIDS

Teknologi terkini untuk mengidentifikasi virus imunodefisiensi dalam tubuh adalah metode cepat. Informasi mengenai analisis tersebut dapat diperoleh dalam beberapa menit setelah selesai. Keandalan tertinggi ditemukan dalam tes imunokromagrafi - strip tes khusus yang permukaannya disemprotkan lapisan reagen. Antibodi yang terkandung dalam bahan uji bersentuhan dengan reagen sehingga mengubah warna indikator. Setelah beberapa menit, dua garis muncul, menandakan adanya infeksi. Adanya satu garis berarti tidak ada infeksi.

Tes semacam itu dapat digunakan sebagai tes tambahan, informasi tentang tes tersebut harus dikonfirmasi oleh penelitian lain.

Berapa biaya tes HIV cepat?

Tes cepat HIV akan menelan biaya rata-rata 200-1000 rubel.

PCR HIV adalah salah satu metode yang paling dapat diandalkan untuk membuat diagnosis ini, yang berbahaya bagi kesehatan dan kehidupan manusia. Seorang dokter mungkin merekomendasikan pengujian kepada siapa pun yang memiliki alasan untuk mencurigai adanya infeksi virus human immunodeficiency virus. Pasien sering bertanya-tanya apa inti dari teknik ini dan apa kelebihan dan kekurangannya.

Kapan dan dalam jangka waktu berapa sebaiknya Anda mengunjungi rumah sakit untuk menyerahkan biomaterial untuk penelitian?

PCR adalah pendekatan diagnostik yang muncul dalam kedokteran klinis berkat biologi molekuler. Dari cabang ilmu inilah penelitian kedokteran muncul. Dan mulai aktif digunakan untuk membuat berbagai diagnosis, termasuk infeksi HIV.

Semua orang tahu bahwa setiap organisme hidup terdiri dari DNA dan RNA. Reaksi berantai polimerase didasarkan pada kemampuan asam nukleat ini untuk mereplikasi diri.

Penting untuk diingat bahwa PCR mampu mendeteksi partikel virus dalam konsentrasi kecil sekalipun di dalam darah. Hal ini terjadi karena adanya “fragmen” asam nukleat yang bersirkulasi dalam cairan biologis, yang ditangkap dan dikenali oleh peralatan khusus. Hal ini memungkinkan Anda membuat diagnosis yang benar meskipun infeksi terjadi baru-baru ini.

Dan partikel virus tersebut belum sempat berkembang biak di dalam tubuh pasien. Bahan biologis yang diperoleh dari pasien ditempatkan dalam reaktor khusus. Darah vena paling sering digunakan.

Komponen khusus, yang berinteraksi dengan partikel virus, sangat meningkatkan jumlah fragmen yang terdeteksi. Hasilnya, fragmen-fragmen tersebut dapat diidentifikasi, dapat dinilai, dan kesimpulan dapat ditarik mengenai infeksi tersebut.

Donor darah dari vena sesuai dengan metode standar.

Jangan makan sebelum mengunjungi dokter, sebaiknya datang pada pagi hari. Jika pasien sedang menjalani imunostimulasi, maka harus dihentikan dua minggu sebelum tes.

Pro dan kontra dari teknik ini

Seperti metode lain untuk mendiagnosis penyakit tertentu, tes PCR memiliki sejumlah kelebihan dan kekurangan. Keuntungan dari metode ini meliputi:

  • kemungkinan rendah untuk mendapatkan hasil negatif palsu atau positif palsu;
  • kemampuan untuk menggunakan tidak hanya darah untuk penelitian, tetapi juga cairan biologis lainnya, seperti keputihan, air mani, dll. (namun, menurut dokter, keakuratannya mungkin menurun);
  • kemampuan menggunakan bahan yang diambil sekali untuk mendiagnosis beberapa penyakit sekaligus;
  • kecepatan memperoleh hasil (jika analisisnya mendesak, hasilnya diterima keesokan harinya);
  • kemampuan untuk mendiagnosis infeksi dengan cepat dan, karenanya, memulai pengobatan penyakit tersebut, sehingga meningkatkan prognosis;
  • tidak ada batasan umur (pengambilan sampel darah dari vena dapat dilakukan bahkan pada bayi yang baru lahir).

Tentu saja PCR juga memiliki kelemahan. Ini termasuk:

  • biaya penelitian yang cukup mahal, terutama dibandingkan dengan metode skrining dasar yang digunakan di sebagian besar rumah sakit;
  • kebutuhan peralatan canggih yang juga mahal;
  • masih ada kemungkinan hasil yang salah jika teknologi analisis, proses pengambilan sampel darah rusak, atau orang tersebut menderita penyakit autoimun, tumor, atau penyakit menular kronis.

Tentu saja, tes PCR harus dilakukan atas rekomendasi dokter.

Dokter akan dapat menilai dalam setiap kasus seberapa andal hasilnya. Jika dokter menganggap hal ini perlu, ia akan menyarankan pasiennya metode diagnostik lain selain PCR. Atau, setelah menerima hasilnya, dia akan melengkapi rencana tindakan diagnostik dengan item tambahan.

Banyak pasien khawatir dengan pertanyaan apakah semua orang menjalani tes PCR untuk HIV. Faktanya, diagnosis tidak diperlukan untuk semua orang. Namun, ada kelompok pasien yang terkadang harus mendonorkan darahnya untuk dianalisis.

  • Diagnosis awal
  • Tes imunoglobulin positif

Immunoblotting yang memberikan hasil positif untuk human immunodeficiency virus harus dikonfirmasi dengan menggunakan reaksi berantai polimerase. Lakukan hal yang sama jika PCR dilakukan terlebih dahulu. Saling melengkapi penelitian hampir sepenuhnya menghilangkan kemungkinan kesalahan.

  • Kontrol terapi

Pasien dengan status terkonfirmasi HIV cukup rutin mendonorkan darahnya untuk tes PCR. Hal ini diperlukan untuk memantau kemajuan pengobatan dan, jika perlu, menyesuaikan terapi.

  • Penilaian keamanan darah

Setiap darah yang disumbangkan harus diuji menggunakan reaksi berantai polimerase.

Ini menghilangkan penularan infeksi HIV melalui transfusi darah.

  • Penilaian status bayi baru lahir

Jika seorang anak lahir dari ibu HIV positif, ia juga harus menjalani PCR. Hal ini diperlukan untuk menentukan status anak dan mengembangkan taktik untuk penanganan selanjutnya.

Keandalan penelitian

Banyak pasien khawatir dengan pertanyaan tentang seberapa andal reaksi berantai polimerase jika mereka berencana untuk mendiagnosis human immunodeficiency virus. Terlepas dari kenyataan bahwa PCR adalah salah satu metode paling modern, Anda masih tidak bisa mempercayainya 100%.

Saat ini, PCR masih belum digunakan sebagai metode skrining karena dapat memberikan hasil positif palsu.

Untuk menghindari hal ini, dokter menyarankan untuk mempersiapkan pengumpulan biomaterial dengan baik, tetapi persiapan pun tidak selalu membantu. Misalnya, tes dapat memberikan hasil positif jika seseorang memiliki tumor ganas di tubuhnya. Jika dia menderita penyakit apa pun infeksi kronis atau, misalnya, proses autoimun. Meskipun ada kemungkinan mendapatkan hasil positif palsu, dalam praktiknya PCR digunakan sebagai salah satu metode yang paling dapat diandalkan.

Untuk menghilangkan kesalahan, dokter seringkali menganjurkan pasiennya untuk melakukan tes lagi jika hasilnya positif. Selain itu, dalam beberapa kasus, disarankan untuk melakukan reaksi ELISA dan penelitian lainnya. Melakukan serangkaian tes selalu memberikan hasil yang lebih dapat diandalkan daripada hanya melakukan satu penelitian.

Tes ini dapat digunakan untuk apa?

Tidak semua pasien mengetahui sebenarnya kegunaan reaksi berantai polimerase dalam praktik klinis dokter.

  • Penyakit ini perlu dideteksi pada masa laten

Virus imunodefisiensi dapat bertahan lama di dalam tubuh secara laten.

PCR merupakan satu-satunya tes yang dapat menunjukkan adanya patogen di dalam tubuh. Padahal partikel virusnya masih sangat sedikit.

  • Pembentukan genotipe

Saat ini, beberapa genotipe infeksi HIV telah diidentifikasi. Seringkali penting untuk menentukan genotipe spesifik mana yang menginfeksi seseorang, karena pemilihan obat antivirus bergantung pada hal ini.

  • Penentuan virus, dan bukan antibodi terhadapnya

Salah satu kelebihan analisis ini adalah teknik ini tidak dapat mendeteksi antibodi terhadap partikel virus, namun virus itu sendiri.

Banyak pasien yang tertarik mengapa ini merupakan keuntungan. Intinya adalah jika penekanannya adalah pada pendeteksian patogen itu sendiri, kemungkinan terjadinya reaksi positif palsu karena kesamaan antibodi yang berbeda akan berkurang. Sebagaimana dicatat oleh para dokter, dalam banyak hal, kemampuan untuk mendeteksi virus itu sendiri, dan bukan antibodi, yang menjadikan teknik ini sangat efektif.

Kapan jatuh temponya?

Pasien seringkali tertarik dengan pertanyaan berapa lama waktu yang dibutuhkan untuk mengunjungi dokter untuk mendonorkan bahan biologis.

Itu semua tergantung pada apa sebenarnya yang Anda rencanakan untuk ditentukan menggunakan teknik ini.

Dianjurkan untuk mencari DNA human immunodeficiency virus jika dicurigai adanya infeksi dan diagnosis dini diperlukan. Rata-rata, DNA dalam darah mulai terdeteksi sepuluh hari setelah infeksi terjadi. Namun, dianjurkan untuk mengkonfirmasi analisis menggunakan ELISA, pertama setelah 4 minggu sejak infeksi, dan kemudian setelah 12 minggu.

Jika ELISA memastikan diagnosis, status pasien dianggap positif.

Penelitian untuk menentukan RNA selalu bersifat kuantitatif. Direkomendasikan jika status positif pasien sudah terkonfirmasi dan pengobatan dengan terapi antiviral telah dimulai. Jika ada banyak RNA di dalam tubuh, maka fase akut penyakit ini didiagnosis. Jika tidak cukup, penekanan patogen dianggap berhasil, dan terapi dapat diubah menjadi lebih lembut.

  • Penilaian resistensi

Beberapa jenis HIV resisten terhadap obat yang digunakan untuk mengobatinya. Sebuah penelitian juga direkomendasikan untuk menilai kemungkinan tidak adanya respons terhadap pengobatan. Ini dilakukan jika tidak ada perbaikan setelah terapi yang ditentukan. Hal ini juga dianjurkan selama periode akut proses infeksi.

Virus human immunodeficiency virus semakin menyebar ke seluruh populasi manusia setiap tahunnya. Setiap orang dapat menghadapi patologi, dan oleh karena itu terkadang penting untuk mengetahui cara membuat diagnosis yang benar.

PCR – metode yang bagus diagnosis jika digunakan dengan benar oleh dokter. Dan yang utama bagi pasien adalah mengikuti anjuran dokter untuk mempersiapkan penelitian yang tidak ribet.