Анализ пцр на 5 инфекций. Анализ ПЦР — самый точный анализ на инфекции. Метод ПЦР позволяет

Для успешного лечения самым важным моментом является быстрая и безошибочная диагностика. В последнее время перечень методик и возможностей диагностических центров, поликлиник и больниц в сфере диагностирования постоянно расширяется. После появления относительно новой методики - ПЦР-анализа, этот метод быстро завоевал приверженцев среди медицинских работников, поскольку часто является незаменимым при выявлении инфекционных заболеваний.

Сфера применения метода, основанного на полимеразной цепной реакции, не ограничивается медициной, но самое большое распространение ПЦР-диагностика получила для выявления различных болезней.

К неоспоримым достоинствам ПЦР можно отнести следующие:

Очень высокая чувствительность. Обычно говорят о чувствительности от 95 до 100%, но это усредненные данные. Этот показатель отличается для разных микроорганизмов. Так, для гепатита С он не бывает ниже 97% (при условии выполнения всех требований), а для определения уреаплазмоза - не менее 99%. Такая чувствительность является самой высокой на данный момент, поэтому способ почти не имеет конкурентов по этой характеристике.
Возможность применения на самых ранних стадиях. В то время, когда другие методы диагностики еще не способны выявить возбудителя из-за его малого количества в образце пробы, ПЦР уже выдает корректный результат. Обнаружить присутствие возбудителя можно даже при наличии единственного экземпляра, а в некоторых случаях - только фрагмента микроба. По этой причине способ применяется и при хронических или скрытых течениях патологий, а также в стадии инкубации.
Широкий спектр результатов. Анализ способен выявить одновременно несколько возбудителей, для этого не понадобится проводить повторные манипуляции. Иногда удается найти возбудителей, которые даже не предполагались при первичной диагностике.
Универсальность образцов. В качестве пробы могут быть представлены образцы крови, слюны, мокроты, волосы, выделения из влагалища, клетки разных тканей.
Скорость получения результатов. В большинстве случаев ответ получают через 5-6 часов. Для культурального анализа, приближающегося к полимеразной цепной реакции в плане точности, такой же результат можно получить в срок от нескольких дней до пары недель.
Количественное определение возбудителя. Этот параметр позволяет определять титр микробов в материале, а это свойство часто необходимо для оценки эффективности выбранной тактики лечения.
Выявление самого микроорганизма, а не определение его реакций. Большинство анализов основаны на ответной реакции возбудителя на химические реактивы, окрашивание и т. д. Этот способ диагностики позволяет обнаруживать непосредственно микроб, а не косвенные признаки, антитела и т. п.

Несмотря на такой широкий перечень преимуществ, у метода есть и некоторые недостатки:

Из-за загрязнения пробы предыдущим образцом может произойти ложное выявление микроорганизмов. Такое происходит при загрязнении инструментов или реактивов, участвующих в ходе анализа. Даже в воздухе присутствуют фрагменты микробов, способных отразится на результате, поэтому в таких лабораториях обязательно должен быть установлен биологический фильтр с максимальной степенью очистки воздуха.
Ложноотрицательный результат. Даже при всех явных проявлениях болезни иногда получают отрицательные данные. Причина этого – в неверно выбранном месте для взятия образца, поэтому персонал лаборатории должен обладать достаточной квалификацией, знаниями и опытом.
Оценка данных должна производиться исключительно лечащим врачом, потому что интерпретация результатов ПЦР-анализа - сложный процесс. Наличие положительного ответа не всегда означает болезнь. Дело в том, что после того, как заболевание успешно пролечено, фрагменты возбудителя долго присутствуют в крови, поэтому заключение может сделать только очень квалифицированный специалист.
Высокая стоимость диагностики с применением полимеразной цепной реакции. Цена обусловлена дорогостоящим оборудованием и высокими требованиями к условиям лабораторий и квалификации персонала.

Обязательные условия для получения точных данных в ПЦР-лабораториях:

корректный механизм забора проб и их правильная транспортировка в лабораторию;
точное соблюдение методик в ходе выполнения анализа;
высокая стерильность и максимальная автоматизация процесса;
использование одноразовых инструментов;
система внутрилабораторного контроля для подтверждения достоверности данных.

При условии выдерживания всех требований на основе данных, полученных при помощи методики ПЦР, можно не только определить болезнь, но сделать прогноз ее течения и составить алгоритм лечения.

Суть метода

Полимеразная цепная реакция позволяет быстро скопировать и воспроизвести ДНК-цепочки микроба, который вызвал заболевание. Для того, чтобы процесс шел быстро, используют специальные ферментные препараты, ускоряющие репликацию и постройку цепочки нуклеотидов.

После того, как процедура происходит в полном объеме, присутствие в пробе возбудителя увеличивается в миллионы раз, после чего его выявление и идентификация не составляют проблемы.

Лаборант может сравнить полученный образец с представленными в базе данных и безошибочно назвать его, а также определить его исходное количество.

Кроме того, методика позволяет клонировать отдельные участки цепи ДНК, вызывать в них необходимые мутации, объединять и комбинировать участки между собой.

Сферы применения

Самое большое распространения ПЦР-диагностика получила в медицине. С помощью нее можно определить вирусные, инфекционные, наследственные болезни, причем сделать это можно не только в активной фазе, но и сразу после заражения.

Области медицины, в которых метод ПЦР активно используется для диагностики:

урология и гинекология - для обнаружения большинства венерических заболеваний (уреаплазмоз, герпес, сифилис, гонорея, гарднереллез, трихомониаз, хламидиоз, ВИЧ, микоплазмоз, папилломавирус человека, кандидоз и пр.);
пульмонология - при туберкулезе или пневмониях бактериальной или вирусной природы;
гастроэнтерология - при хеликобактериозе;
в гематологии - при цитомегаловирусе, различных онковирусах крови;
в области инфекционных болезней - для выявления дифтерии, сальмонеллеза, мононуклеоза, листериоза, гепатитов вирусного происхождения, энцефалита;
в онкологии - для определения рака груди, лейкемии, лимфомы.

Этот метод применяют и в неонатологии, педиатрии, офтальмологии, неврологии - практически в любой отрасли медицины он оказался необходим.

На видео подробно рассказано, какие инфекции можно выявить с помощью полимеразной цепной реакции.

Большинство заболеваний, передающихся половым путем, быстро и успешно диагностируются именно благодаря ПЦР-диагностике. Кроме определения возбудителя, этот метод позволяет узнать конкретный штамм микроорганизма, что делает возможным выбор наиболее действенного препарата при лечении.

Помимо медицины способ ПЦР используется и в других сферах:

Криминалистика и судебная медицина - помогает установить личность преступника посредством сравнения генетического материала подозреваемого человека с образцами, найденными на месте совершения преступления.
Установление отцовства - сравниваются размноженные генетические наборы родителя и ребенка, находятся идентичные фрагменты, на основании чего можно судить о степени их родства.
Наука использует методику в ходе экспериментов, применяя генные мутации, устанавливая родство эволюционных веток отдельных организмов и т.д.

ПЦР-диагностика в венерологии

Многие инфекции, вызывающие венерические болезни, на начальных стадиях очень сходны по проявлениям и симптоматике, поэтому дифференцировать их достаточно сложно. В то же время раннее определение инфекционного агента позволяет начать лечение как можно раньше и сократить время лечения до минимума, избежав развития возможных осложнений.

Полимеразная цепная реакция - эффективный механизм для определения таких групп заболеваний половой сферы:

бактериальные инфекции (сифилис, донованоз, гонорея, хламидиоз и пр.);
вирусные патологии (папилломатоз, кондиломатоз, ВИЧ, половой герпес и т.д.);
грибки (молочница, баланопостит и пр.)

В дерматовенерологии особенно полезно свойство данной методики находить инфекционных агентов в периоды ремиссий или при носительстве, когда человек может заражать партнеров, не имея при этом симптомов болезни.

Ход анализа полимеразной цепной реакции

Анализ ПЦР происходит в 4 основных этапа:

подготовка материала к копированию;
объединение фрагмента ДНК и праймера;
копирование генетического набора исследуемого материала;
идентификация и оценка полученного ДНК-набора.

Этап 1

Образец подогревают до температуры 94-98°C в специальном приборе - амплификаторе, который программируется на выдерживание точных температур с низкой погрешностью. Заданная температура держится на протяжении минуты-двух. Это необходимо для денатурации ДНК, чтобы двойная спираль разошлась на две отдельные цепочки.

Этап 2

Температура в амплификаторе понижается до 72-75°C для того, чтобы праймер смог распознать сходный с ним участок ДНК-цепи и объединиться с ним.

Праймеры - это специальные реагенты, которые подходят только к одному виду возбудителя. Если необходимо провести анализ на несколько патогенов, то в образец добавляют необходимое количество праймеров.

На этой стадии ДНК реплицирует свою матрицу, используя праймер.

Возможности лаборатории ограничены наличием праймеров для определенных микроорганизмов, поэтому диапазон возможностей определяется наличием таких образцов.

Этап 3

В этом отрезке происходит увеличение генетического материала возбудителя. К праймеру с матрицей приближается фермент и воспроизводит новую цепь ДНК, идентичную той, которая содержалась в первоначальной цепочке.

Когда синтез окончен, завершается один полный цикл полимеразной цепной реакции. По времени он продолжается в среднем до 3 минут. За это время происходит удваивание материала. Дальнейшее увеличение количества цепочек происходит в геометрической прогрессии, и к окончанию анализа успевает пройти 50-80 циклов.

Этап 4

Этап, требующий внимательности и особой тщательности со стороны персонала.

Определение микроорганизма происходит с использованием электрофореза или меток, наносимых окраской. При использовании электрофореза определяющим моментом становится длина фрагментов ДНК, а при использовании меток - развитие окраски в ходе ферментативной реакции.

Разновидности ПЦР-анализов

Вариаций такой ПЦР диагностики существует много. Выбор определенного метода зависит от многих факторов: предположительного диагноза, возможностей доступных лабораторий, метода взятия материала и пр.

Наиболее часто используются такие разновидности ПЦР:

вложенная;
ступенчатая;
с горячим стартом;
виртуальная;
ассиметричная;
в реальном времени и т. д.

Преимущественно используют ПЦР в реальном времени, так как способ характеризуется самыми точными результатами и максимальной скоростью обработки данных. После его применения заключение готово через час-два.

Метод широко используется в педиатрии для выявления вирусов и инфекций крови, генетических заболеваний, TORCH-инфекций. Неонатологи назначают такую диагностику в проблемных случаях буквально с первых дней жизни. Иногда подобная диагностика позволяет обнаружить инфицирование внутриутробных вод, составляющих опасность для развития плода в период активного формирования.

Если врач выдает направление на обследование с применением полимеразной цепной реакции, то он должен уточнить, какой именно биоматериал необходимо предоставить пациенту и каким образом подготовиться к отбору пробы.

Анализ крови

Кровь в качестве биоматериала для тестирования берут при подозрении на ВИЧ, вирусный гепатит, токсоплазмы, половой герпес и цитомегалию. Для большинства этих патогенов до использования этого метода диагностика базировалась на выявлении антител к возбудителю, что сильно затягивало время обнаружения микробов в тот период, когда антитела еще не вырабатываются.

Перед сдачей крови для диагностики в данном случае не нужны особые приготовления, но лучше, если проба будет отобрана натощак. Единственное обстоятельство, способное серьезно исказить результаты - прием антибиотиков, поэтому сдаче должен предшествовать временной отрезок после приема подобных лекарств в несколько дней или недель в зависимости от типа антибиотика.

В самых современных клиниках в последнее время для отбора крови на ПЦР используют вакуумные системы, которые минимально повреждают кожные покровы и сводят к минимуму вероятность попадания в пробу загрязняющих агентов из воздуха, инструментов или рук лаборантов.

Анализ мазка

Используется как в гинекологии, так и в венерологии для определения заболеваний, передающихся половым путем. Часто назначают ПЦР мазка во время беременности для выявления скрытых факторов, способных негативно повлиять на формирование плода или ход беременности.

Подготовка к отбору материала заключается в том, чтобы полностью исключить половые контакты за несколько суток до процедуры. Проводить спринцевания марганцовкой или настоями трав тоже нельзя. На протяжении критических дней и 2-х дней после них мазок на ПЦР-анализ не берется.

Отбор биоматериала производят в лаборатории из влагалища, шейки матки, цервикального канала или уретры.

ПЦР-анализ мазка позволяет выявить патоген, который устойчив к определенному виду антибиотиков. Кроме того, показаниями к такому виду диагностического обследования выступают:

осложненная беременность без видимых причин;
острое течение венерической болезни;
предположительное хроническое течение венерического заболевания;
выявление причин бесплодия или самопроизвольных абортов.

Анализ кала

Анализ кала с применением полимеразной цепной реакции назначается специалистом для уточнения наличия инфекции. Подготовка к отбору пробы кала для ПЦР заключается в следующем:

исключить за несколько суток слабительные средства в виде любых свечей, масел или оральных медикаментов;
не употреблять накануне лекарства или продукты, которые придают калу выраженную окраску.

Материал для ПЦР-определения лучше всего доставить в специальном контейнере для кала с палочкой. Внутреннее пространство контейнера стерильно, поэтому протирать или промывать его не следует. Во время отбора образца важно отслеживать, чтобы не задеть внутреннюю поверхность приемника, также в пробе не должно быть следов мочи. Перед отбором запрещено применение клизм.

Анализ мочи

Такое исследование с помощью ПЦР позволяет извлечь ДНК образец вируса или бактерии. Забор мочи лучше проводить утром натощак. Лучше всего, если это будет происходить непосредственно в лаборатории.

Обязательные условия подготовки для получения результатов исследования мочи в лаборатории полимеразной цепной реакции:

выдержать 3 недели после приема антибиотиков;
перед отбором жидкости не пить и не есть;
запрет вагинального секса за сутки до сдачи пробы;
в контейнер нужно поместить первую порцию материала после пробуждения.

Интерпретация результатов

Расшифровку результатов диагностики проводит специалист, направивший пациента на ПЦР-исследование. В протоколе, выданном лабораторией, может фигурировать отрицательный или положительный результат ПЦР:

Отрицательный - случай, в котором не обнаружено фрагментов возбудителя предполагаемой болезни, то есть человек здоров и не перенес этого заболевания в недавнем времени.
Положительный - в пробе обнаружены РНК или ДНК патогена и человек нуждается в лечении.

Самостоятельно трактовать полученные данные не стоит, так как возрастные нормы могут значительно отличаться, а различные титры - свидетельствовать о совершенно разных стадиях болезни и подходах к терапии.

Вооружившись результатами ПЦР-диагностики, врачу будет легко определить перечень необходимых мер лечения.

Точность ПЦР-диагностики сделала эту методику незаменимой в диагностировании огромного перечня заболеваний и позволила эффективнее выявлять и ликвидировать патогенные процессы, происходящие в организме человека.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – метод высокой точности в области диагностирования наследственных патологий, инфекций, вирусных болезней в любой стадии (острой или хронической), а также - на раннем этапе - до очевидных проявлений болезни путем идентификации возбудителей, на основе их ДНК, РНК, являющихся генетическим материалом, в пробах, которые получают от пациента. И сегодня мы поговорим про суть, этапы диагностики и принципы методов полимеразной цепной реакции (ПЦР), а также о ее стоимости.

Что такое полимеразная цепная реакция

Основа анализа - амплификация (удвоение) – создание множества копий из короткого участка ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты), представляющей генетический комплекс человека. Для исследования нужно очень малое количество физиологического вещества (мокрота, каловые массы, соскоб эпителия, сок простаты, кровь, сперма, околоплодные воды, слизь, ткань плаценты, моча, слюна, жидкость плевральная, цереброспинальная). При этом, например, в мочеполовом тракте больного возможно обнаружение даже единичного вредоносного микроба.

Методику ПЦР (полимеразной цепной реакции) разработал американский ученый К. Мюллисом, в 1993 получивший Нобелевскую премию.

Активно используется:

в раннем диагностировании инфекций, генетических, ;
в судебно-медицинской экспертизе при наличии для исследования крайне малого количества ДНК;
в ветеринарной медицине, фармацевтике, биологии, молекулярной генетике;
для идентификации личности по ДНК, подтверждения отцовства;
в палеонтологии, антропологии, экологии (при отслеживании качества продуктов, факторов внешней среды).

О том, что такое полимеразная цепная реакция, расскажет в подробностях данное видео:

Кому ее назначают

Полимеразная цепная реакция в диагностике инфекционных заболеваний - одна из наиболее надежных методик особой точности и достоверности. К примеру, достоверность проведенного анализа ПЦР на хламидии и на многие другие патогены приближается к 100% (абсолютная). Чаще всего процедуру полимеразной цепной реакции назначают пациентам, у которых при диагностировании возникают сложности с идентификацией конкретного возбудителя.

Лабораторный тест ПЦР применяют:

для обнаружения болезнетворных организмов, вызывающих инфицирование мочевыводящих и половых органов, трудно идентифицируемых при использовании посевов или методов иммунологии;
для повторного диагностирования ВИЧ на начальной стадии в случае положительного, но вызывающего сомнения результата первичного анализа (например, у новорожденных от инфицированных СПИДом родителей);
для установления онкологического заболевания на раннем этапе (изучение мутаций онкогенов) и индивидуальной коррекции схемы лечения у конкретного пациента;
с целью раннего выявления и потенциального лечения наследственных патологий.

Так, будущие родители сдают анализ, чтобы узнать, являются ли они носителями генетической патологии, у детей ПЦР определяет вероятность подверженности болезни, передающейся по наследству.

для обнаружения патологий плода на раннем сроке вынашивания (отдельные клетки растущего эмбриона исследуют на наличие возможных мутаций);
у пациентов перед трансплантацией органов – для «тканевого типирования» (определения совместимости тканей);
для выявления опасных патогенных организмов в донорской крови;
у новорожденных малышей – для выявления скрытых инфекций;
для оценки результатов антивирусного и антимикробного лечения.

Зачем проходить такую процедуру

Поскольку ПЦР - высокоэффективный способ диагностики, дающий почти 100% результат, процедуру используют:

для подтверждения или исключения окончательного диагноза;
быстрой оценки эффективности проводимой терапии.

Во многих случаях ПЦР - единственно возможный тест для обнаружения развивающегося заболевания, если прочие бактериологические, иммунологические и вирусологические методики диагностирования оказываются бесполезными.

Вирусы обнаруживаются с помощью процедуры ПЦР сразу после инфицирования и до появления признаков болезни. Раннее выявление вируса позволяет оперативно назначить лечение.
Так называемая «вирусная нагрузка» (или - количество вирусов в организме) также определяется при анализе ДНК количественным методом.
Конкретные болезнетворные организмы (например, туберкулезную палочку Коха) сложно и слишком долго культивировать. Анализ ПЦР позволяет быстро выявить минимальное количество патогенов (живых и мертвых) в образцах, удобных для исследования.

Подробный анализ ДНК патогена используется:

чтобы определить его чувствительность к конкретным видам антибиотиков, что позволяет немедленно приступить к лечению;
чтобы контролировать распространение эпидемий среди домашних, диких животных;
чтобы выявить и отслеживать новые заразные виды микробов и подтипы патогенов, которые спровоцировали предыдущие эпидемии.

Виды диагностики

Стандартный метод

Анализ полимеразно-цепной реакции проводится на основе многократной амплификации (удвоения) конкретного фрагмента ДНК и РНК при использовании особых ферментов-праймеров. В результате цепочки копирования получается количество материала, достаточное для исследования.

В ходе процедуры копируется только искомый фрагмент (соответствующий заданным конкретным условиям) и в случае, если он действительно присутствует в пробе.

О том, как проходит ПЦР, рассказывает это подробное видео с полезными схемами:

Другие методы

ПЦР, проводимая в режиме реального времени . В этом виде исследования процесс выявления заданного фрагмента ДНК запускается после прохождения каждого цикла, а не после осуществления всей цепочки 30 – 40 циклов. Этот вид исследования позволяет получить информацию о количестве патогена (вируса или микроба) в организме, то есть осуществлять количественный анализ.
ОТ-ПЦР (режим обратной транскрипции) . Этот анализ используют, чтобы найти РНК с одной цепочкой для обнаружения вирусов, генетической базой которых является именно РНК (например, вирус гепатита С, иммунодефицита). При таком исследовании используется особый фермент - обратная транскриптаза и определенный праймер и на базе РНК строится одноцепочная ДНК. Затем из этой цепочки восстанавливают вторую цепь ДНК и выполняется стандартная процедура.

Показания для проведения

Процедура ПЦР применяется в клинике инфекционных болезней, неонатологии, акушерстве, педиатрии, урологии, гинекологии, венерологии, неврологии, нефрологии, офтальмологии.

Показания для назначения анализа:

выяснение риска развития генетических отклонений у ребенка при вероятности наследственных патологий;
диагностирование обоих родителей при планировании беременности или тяжелом состоянии матери при протекающей беременности;
трудности с зачатием, выявление причин бесплодия;
подозрение на половые инфекции в острой стадии и при симптоматике перехода их в хроническую;
обнаружение причин воспалительных процессов неясного происхождения;
незащищенные случайные и постоянные половые контакты;
определение чувствительности патогенного микроорганизма к конкретным антибиотикам;
пациентам с подозрением на скрытую инфекцию для обнаружения патогенов до развития явной симптоматики (доклиническое диагностирование);
больным для подтверждения выздоровления после болезни (ретроспективная диагностика);:

Также используется диагностика при необходимости точного выявления следующих возбудителей::

вирусы гепатита (A B C G), иммунодефицита человека, цитомегаловирус;
вибрион холерный;
вирус простого герпеса, герпетиформные виды;
ретро – адено – и риновирусы;
вирусы краснухи, Эпштейна-Барр, варицелла (Зостер – вирус);
парво – и пикорновирусы;
бактерия Helicobacter pylori;
легионеллы, патогенные типы палочки кишечной;
стафилококк золотистый;
возбудитель ;
клостридии, дифтерийная и гемофильная палочка;

Используется и для определения инфекций:

инфекционный мононуклеоз;
боррелиоз, листериоз, клещевой энцефалит;
кандидоз, вызываемый грибками Candida;
половые инфекции – трихомониаз, уреаплазмоз, бледная трепонема, гарднереллез, гонорея, микоплазмоз, хламидиоз;
туберкулез.

Противопоказания для проведения

Поскольку процедура проводится не с пациентом, без какого-либо воздействия на организм, а с биологическим материалом, взятым для исследования, то никаких противопоказаний для ПЦР не имеется по причине отсутствия потенциальной опасности.

Однако забор биоматериала из шеечного канала матки не проводят после процедуры кольпоскопии. Сдача мазков, соскобов на анализ разрешена только через 4 – 6 дней после окончания менструации и полного прекращения выделений.

Безопасен ли метод

Никакое негативное влияние на пациента при изолированном исследовании его биоматериала в лабораторных условиях невозможно.

Подготовка к процедуре (сдача биологических веществ на анализ)

В качестве образца для анализа ПЦР, при котором выявляют ДНК чужеродного патогена, служит любая биологическая жидкость, ткань, выделения организма. Забор исследуемого вещества проводят в виде взятия крови из вены, соскоба из гортани, полости носа, мочеиспускательного канала, плевральной полости, шейки матки.

Перед диагностической процедурой врач объясняет пациенту, забор какого материала будет взят:

При обследовании на половые инфекции, производится забор выделений из половых органов, моча, мазок из уретры.
При анализе на герпетические инфекции, цитомегаловирус, мононуклеоз – берут на анализ мочу, мазок из зева, на гепатит, токсоплазмоз - кровь из вены.
С целью диагностирования различных видов проводится забор спинномозговой жидкости.
В пульмонологии образцы для анализа - мокрота и жидкость плевральная.
Когда проводят исследование возможных внутриутробных инфекций при вынашивании плода для анализа используют околоплодные воды и клетки плаценты.

Достоверность и точность анализа зависит от стерильности условий при взятии материала. Поскольку исследование ПЦР обладает высокой чувствительностью, любое загрязнение исследуемого вещества способно искажать результат.

Грамотная подготовка к сдаче биоматериала не представляет для пациентов никаких трудностей. Имеются определенные рекомендации:

при анализе на половые инфекции:
- исключить интимные контакты за 72 часа до сдачи материала;
- прекратить использование любых вагинальных средств за 3 суток;
- с вечера предыдущего дня не проводить гигиену исследуемой области;
- исключить мочеиспускание за 3 – 4 часа при взятии пробы из уретры;
прекратить прием антибиотиков за месяц до сдачи анализов на инфекции;
кровь сдают утром до принятия еды и питья;
сбор первой утренней порции мочи проводится в стерильный контейнер после тщательного интимного туалета.

О том, как проводится диагностика по методике полимеразной цепной реакции, читайте ниже.

Как проходит процедура

При выполнении исследования ПЦР раз за разом в реакторе (амплификаторе или термоциклере) повторяются определенные циклы:

Первый шаг – денатурация . Слюну, кровь, биоптат, гинекологические пробы, мокроту, в которых подозревается присутствие ДНК (или РНК) патогена, помещают в амплификатор, где происходит нагревание материала и расщепление ДНК на две отдельные цепочки.
Второй шаг – отжиг или небольшое охлаждение материала и добавление к нему праймеров, способных распознавать нужные участки в молекуле ДНК и связываться с ними.
Третий шаг – элонгация – происходит после присоединения 2 праймеров к каждой из цепочек ДНК. В ходе процесса фрагмент ДНК патогена достраивается, и формируется его копия.

Эти циклы повторяются по типу «цепной реакции», каждый раз приводя к удвоению копий специфичного фрагмента ДНК (например, отрезка, где запрограммирован определенный вирус). За несколько часов образуется множество копий фрагмента ДНК, и выявляется их присутствие в образце. После этого проводят анализ и сравнение результатов с данными базы различных видов патогенов, чтобы определить вид инфекции.

Про расшифровку результатов и вывод исходя из ПЦР-реакции читайте ниже.

Расшифровка результатов

Окончательный результат исследования выдается через 1 – 2 суток после сдачи биологического материала. Нередко – уже в первые сутки после анализа.

Качественный анализ

Отрицательный результат означает, что в веществе, сданном на исследование, следов возбудителей инфекции не обнаружено.
Положительный результат означает выявление патогенных вирусов или бактерий в биологическом образце с очень высокой степенью точности на момент сдачи материала.

Если результат положительный, но признаков активизации инфекции не выявлено – такое состояние организма называют бессимптомным «здоровым носительством». Чаще всего наблюдается при взятии биоматериала из определенного места (цервикальный канал, уретра, полость рта) при вирусных заболеваниях. Лечения в этом случае не требуется, но обязательно постоянное врачебное наблюдение, поскольку существует вероятность:

распространения вируса от носителей и заражение здоровых людей;
активизации процесса и переход заболевания в хроническую форму.

Однако - если положительным является анализ крови, это указывает на то, что инфекция поразила организм, и это уже не состояние носительства, а патология, требующая незамедлительной специфической терапии.

Количественный анализ

Количественный результат определяет специалист конкретно для определенного вида инфекции. На его основании можно оценить степень развития, стадию болезни, что дает возможность оперативно назначить правильное лечение.

Средняя стоимость

Цены на проведение полимеразной цепной реакции определяют: вид исследования, сложность идентификации возбудителя, трудность забора биологического материала, вид анализа (качественный или количественный), уровень цен в лаборатории.

С другой стороны, при исследовании ПЦР можно определить сразу несколько патогенов при заборе одного вида материала для анализа. Это позволяет сэкономить на других лабораторных анализах.

Ориентировочно, стоимость анализа ПЦР в рублях:

гонококк, гарднерелла, трихомонада вагиналис – от 180
хламидия трахоматис – от 190
папилломавирус – от 380 до 500
биоценоз урогенитального тракта у женщин (количественная и качественная оценка микрофлоры) – от 800.

Еще больше полезной информации в отношении исследования ПЦР содержится в видеосюжете ниже:

Полимеразная цепная реакция известна уже 30 лет. Ее широко используют во многих областях, начиная с археологии и заканчивая генетикой. Именно метод пцр помогает установить отцовство, но наиболее часто его используют для выявления различных инфекционных болезней в организме человека. Что же из себя представляет анализ методом пцр?

Это ни что иное как имитация процесса размножения ДНК, в результате чего из крошечного фрагмента молекулы ДНК в течение некоторого времени (обычно хватает нескольких часов) получают огромное количество идентичных молекул, которые уже можно изучать. Вам это ничего не напоминает? Очень похоже на клонирование. Именно полимеразная цепная реакция является основой клонирования и применяется при воспроизводстве тканей в лабораторных условиях. Ну, а в медицине анализ пцр используют для выявления в организме человека бактерий (микоплазм, , , а также возбудителей и ), вирусов (, и папилломавируса), грибов (возбудителей ) и простейших (трихомонады).

Данный метод молекулярной диагностики инфекционных возбудителей является наиболее чувствительным. Позволяя обнаружить даже единственный фрагмент ДНК в образце, метод пцр практически не имеет предела чувствительности. И в большинстве случаев его результат показывает 100% точность, особенно при диагностике бактериальных инфекций. Он никогда не дает ложноположительных результатов.

Также он является универсальным, так как позволяет выявить одновременно несколько микроорганизмов в одной пробе, в то время как бактериологические методы используют разные способы культивирования для разных групп возбудителей. Кроме того, пцр существенно облегчает задачу исследователей, сокращая время на проведение теста до 24 часов и упрощая требования к транспортировке образцов. Если материал для бактериологических и вирусологических методов должен быть живым, то для метода пцр подходит все, что содержит ДНК, даже мертвые клетки.

Анализ пцр на инфекции крайне важен потому, что большинство из них, поражая организм человека, развиваются бессимптомно или имеют схожие признаки. Так например, метод пцр широко применяют для выявления причин заболеваний печени, среди которых А, В, С, D, Е, а также вирус простого герпеса. Для борьбы с каждым из вирусов необходимо применять совершенно различные тактики лечения. Поэтому для назначения эффективной терапии врачу нужно точно выявить возбудителя. А если проводить затяжные исследования, инфекция может перейти в хроническую форму, вызвав осложнения, которые особо опасны при беременности или других сопутствующих заболеваниях. И именно метод пцр является главным помощников в быстрой и точной диагностике.

Но здесь нужно понимать, что являясь чуть ли ни единственным методов выявления одних микроорганизмов (например, микоплазмы), пцр может совершенно не подходить для других (стафилококков, стрептококков, , и т.д.) Поэтому выбирать методы диагностики и назначать лечение должен специалист. Самостоятельно отправляться в лабораторию и делать все анализы подряд не стоит. Они могут оказаться абсолютно бесполезными. А в частных клиниках по Вашему желанию и за Ваши деньги Вам проведут любые анализы, даже не поинтересовавшись, зачем они Вам нужны.

Как берут анализ пцр

Для проведения исследований методом пцр используют биологические жидкости и выделения человеческого организма, в которых могут содержаться микробы и их фрагменты. К ним относятся: кровь, слюна, мокрота и моча. Кроме того, для анализа пцр берут соскобы эпителиальных клеток слизистой оболочки уретры и цервикального канала. Например, для выявления вируса ВИЧ и гепатита берут кровь из вены. Для диагностики инфекций половых органов анализируют выделения из половых органов, мазок из шейки матки или мочеиспускательного канала. А для диагностики инфекционного мононуклеоза используют мазок из зева.

Подготовка к пцр анализу

Перед сдачей анализа нужно проконсультироваться с врачом и тщательно следовать его рекомендациями. Спросите у доктора, какие именно материалы будут брать для исследования. Анализ крови пцр сдают натощак. А вот перед тем, как сдавать анализ пцр в виде соскобов эпителиальных клеток, врачи рекомендуют пациентам вечером выпить пива, сходить в баню и заняться сексом. Звучит странно, но все это активизирует инфекцию в половых органах, которая может протекать в очень слабой форме, и помогает ее выявить.

Расшифровка пцр анализа

Результат анализа пцр может быть положительным и отрицательным. Это всегда отмечают в документе, который в обязательном порядке должны выдать в лаборатории. Положительный результат означает, что в биологическом материале, который сдал пациент, были обнаружен ДНК инфекции. Отрицательный результат означает отсутствие инфекции в организме человека.

Так как метод пцр обладает высокой чувствительностью, использовать его для контроля эффективности лечения нужно очень осторожно и только спустя несколько недель после проведенной терапии. Ведь даже фрагмент ДНК мертвого возбудителя даст положительный результат анализа пцр.

Полимеразная цепная реакция помогает врачам диагностировать инфекции, которые протекают в организме человека в скрытой форме, не допуская их развития и сильного поражения внутренних органов. Внимательно следите за состоянием своего здоровья и при первых подозрениях на наличие у Вас инфекции обращайтесь к доктору.

В большинстве случаев пациентам приходится сталкиваться с такой ситуацией, когда для обследования или определения заболевания требуется ПЦР диагностика. Важно понимать, что она собой представляет и для чего необходима.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) – это такое исследование, которое помогает определить многие заболевания на начальных этапах развития. Суть его заключается в нахождении ДНК или РНК присутствующего в организме патогена. ПЦР позволяет определить возбудитель в тех случаях, когда другие виды исследования неэффективны.

Популярность данного метода состоит в простоте и широте использования. Он применяется клиницистами для диагностики различных заболеваний. Позволяет быстро проводить сложные количественные и геномные исследования.

Одним из наиболее важных медицинских применений классического метода ПЦР является обнаружение микроорганизмов, которые способны вызывать патологические состояния.

Суть анализа ПЦР

ПЦР диагностика (что это такое, объясняется молекулярной биологией) является методом молекулярного клонирования, используемого для анализа короткой последовательности ДНК, которая присутствует в минимальных количествах в образцах, содержащих какой-либо генетический материал. Этот метод часто называют «копировальным аппаратом ДНК».

ПЦР диагностика осуществляется in vitro (вне тела) в лаборатории и основана на естественном процессе удвоения ДНК перед её делением. Кроме возможности обнаружить вирус, бактерию или другие микроорганизмы в образце, ПЦР позволяет идентифицировать их количество.

При таких заболеваниях, как заражение вирусом гепатита С или вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), вирусная нагрузка является хорошим показателем того, на каком этапе находится заболевание и насколько эффективной является терапия.

Вооруженные этой информацией, врачи могут определить, когда следует начинать лечение, а также контролировать сам процесс. Это позволяет составить индивидуальный подход для каждого пациента.

ПЦР диагностика включает три этапа, в каждом из которых количество ДНК-мишени увеличивается в разы. В результате такой реакции получается более одного миллиарда копий исходной или «целевой» ДНК, что и позволяет оценить присутствие вируса в организме. Это и является основным свойством метода ПЦР.

Преимущества и недостатки метода

ПЦР диагностика (что это такое, рассказано выше) была подробно описана Кери Муллисом в 1983 году. С тех пор метод пользуется огромной популярностью в лабораторной практике.

Основными преимуществами такого вида исследования является:

универсальность;
быстрота результатов;
высокая вероятность получения достоверных результатов;
специфичность;
многообразие заболеваний, которые можно определить.

Универсальность метода ПЦР состоит в возможности использования любых физиологических материалов человека. Даже одного волоса достаточно для анализа.

Процесс обработки данных, благодаря автоматизации, может занять несколько часов. Специфичность состоит в выделении определённого ДНК-фрагмента, характерного для конкретного возбудителя. С помощью ПЦР-анализа могут быть диагностированы многие заболевания, как в стадии обострения, так и в стадии скрытого течения.

Но, несмотря на огромное количество достоинств, метод диагностики ПЦР имеет и недостатки:

вероятность ложноположительных результатов;
высокая чувствительность;
изменчивость микроорганизмов.

Основной недостаток метода состоит в неспособности ПЦР отличить живые микроорганизмы от погибших . Как правило, это относится к ситуации, когда следует оценить успешность проводимого лечения. В этом случае, если болезнь пролечили, то мёртвые клетки ещё некоторое время находятся в организме человека и для полного его обновления необходимо некоторое время от 4 до 6 недель.

Высокая чувствительность является преимуществом и в то же время недостатком. Некоторые микроорганизмы в малом количестве присутствуют в организме. Поэтому в этом случае этот метод диагностики не является информативным, и рекомендуется применять другие типы исследования.

Любые микроорганизмы способны мутировать. И даже несмотря на то, что в процессе амплификации используется специфичный фрагмент, который наименее подвержен изменениям, он все равно может приобретать мутации и становиться невидимым для тест-системы. Такая ситуация объясняет тот факт, что различные системы лабораторных анализов могут показывать абсолютно разные результаты.

В каких сферах используется метод

Исследование ПЦР может применяться в клинической практике для идентификации различных заболеваний. Широко используется в гинекологии, урологии, гастроэнтерологии, онкологии и др. Кроме того, он эффективно применяется в криминалистике для установления личности и при установлении отцовства.

Данный тип исследования используется на этапе планирования и во время беременности. Анализ на TORCH-инфекции проводится для того, чтобы выявить присутствие инфекции в организме женщины. Заболевания, вызванные одной из инфекций, могут протекать в легкой форме для женщины, но вызывать серьёзные врождённые дефекты плода, вплоть до его гибели.

Также метод ПЦР диагностики помогает определить генетическую предрасположенность человека к развитию определённых заболеваний в будущем.

Какие инфекции выявляет диагностика методом ПЦР

Метод ПЦР помогает выявить вирусы, бактерии и грибки.

Наиболее распространённые болезни, которые можно диагностировать с его помощью:

Какие биологические материалы исследуются

Учитывая заболевание, симптомы и цели исследования ПЦР-диагностика может использовать любую жидкость физиологического характера или частичку ткани.

Это может быть:

кровь;
слюна;
мокрота;
моча;
испражнения;
мазок из ротоглотки;
кусочек поражённой ткани;
синовиальная жидкость;
соскоб из влагалища у женщин или из уретры у мужчин;
эякулят;
волосы и другие.

При заболеваниях мочеполовой системы берётся моча, мазок из влагалища у женщин или из уретры у мужчин. Венозная кровь сдаётся для диагностики таких заболеваний, как ВИЧ, гепатиты различных типов, TORCH-инфекции.

Для того, чтобы исключить или подтвердить онкологию, во время хирургических вмешательств изымаются кусочки ткани на биопсию.

Как подготовиться к анализу

Особенности подготовки к исследованию зависят от биоматериала, который сдаётся. Также следует помнить о том, что необходимо исключить приём антибиотиков и других медикаментозных средств. Для контроля эффективности лечения следует выдержать интервал после приёма препаратов не менее 4 недель.

Кровь сдаётся с утра натощак. Моча и кал должны быть помещены в предназначенный для этого, абсолютно стерильный контейнер. При этом, перед сбором мочи необходимо провести гигиену внешних половых органов.

Если сдаётся мазок, необходимо:

не мочиться в течение 3-х часов;
не рекомендуется подмываться и спринцеваться накануне (для женщин);
за сутки прекратить половую жизнь;
женщинам мазок следует сдавать в середине цикла.

Этапы ПЦР-исследования

Перед началом ПЦР, ДНК должна быть выделена из образца. Выделение ДНК представляет собой многоступенчатый процесс, который может быть выполнен вручную или инструментально.

После подготовки образца начинается трехступенчатый процесс ПЦР:

разделение целевой ДНК (денатурация);
амплификация (размножение) ДНК-фрагментов;
детекция (выявление) амплифицированных фрагментов ДНК.

Первый этап ПЦР имеет название денатурация. Суть его состоит в том, что пробирку с ДНК образцами нагревают до высоких температур (приблизительно 90 градусов). Из-за высоких температур разрушаются слабые связи между нуклеотидами, образующими код молекул. В результате этого происходит разделение двухцепочечной ДНК или РНК на две отдельные нити.

Для «чистоты» исследования в исследуемый биоматериал добавляется специальный раствор, который растворяет органические вещества. Продолжительность данного этапа зависит от вида исследуемого материала и возбудителя инфекции.

ПЦР диагностика (что это такое, описано выше) на втором этапе осуществляет размножение ДНК-фрагментов на основе самой ДНК инфекции. ПЦР не копирует всю нуклеиновую кислоту в образце. Он копирует только особую последовательность генетического кода, короткий фрагмент (праймер).

На втором этапе пробирка охлаждается. Весь процесс ПЦР автоматизируется с помощью машины, называемой термостатом или амплификатором, и может быть завершен в течение нескольких часов. Машина ПЦР запрограммирована на изменение температуры реакционной смеси каждые несколько минут. Это происходит для того, чтобы короткие фрагменты смогли связаться с одноцепочечной матрицей.

Амплификация происходит в 30-40 циклов. В этот период врач-лаборант копирует ДНК-фрагмент и увеличивает его количество методом цепной реакции. Таким образом, с каждым циклом, количество копий возрастает до нескольких миллионов или даже миллиардов.

В третьей фазе исследования происходит выявление присутствия ДНК вирусов и бактерий. Это осуществляется путём распределения полученной смеси и добавления в неё специального раствора. Эта жидкость позволяет фрагментам ДНК приобретать определённую окраску под действием ультрафиолетовых лучей. Это и является индикатором того, что патогенные микробы присутствуют в организме человека.

ПЦР во время беременности

ПЦР диагностика (что это такое, описано выше) впервые может назначаться при беременности, так как является обязательной процедурой. Этот метод помогает выявить скрытые инфекции и угрозу развития пороков у плода.

Для проведения анализа используют:

Существуют заболевания инфекционного характера, которые могут негативно влиять на развитие плода, вызывая пороки, стать причиной преждевременных родов и выкидышей. Они особенно опасны в первом триместре беременности и, в большинстве случаев, являются медицинским показанием для прерывания беременности. Эти инфекции имеют общее название TORCH-комплекса.

Анализ ПЦР помогает установить наличие или отсутствие инфекции в организме беременной женщины. Зачастую проводится на этапе планирования беременности или в первом триместре. В случае положительного результата, требуется повторное проведение исследования. И только после подтверждения результатов, назначается соответствующее лечение.

ПЦР для диагностики ВИЧ

Метод ПЦР для диагностики ВИЧ-инфекции является дорогостоящим анализом и используется по особым показаниям. К ним относится донорство, а также он может быть назначен пациентам, пострадавшим в автомобильной аварии с людьми, носителями ВИЧ.

ПЦР помогает установить наличие инфекции на ранних сроках до того, как организм выработает антитела к ВИЧ. Результат с высоким процентом вероятности исследование может показать уже через 5-14 дней после проникновения вируса.

В других случаях наличие вируса в организме человека помогает установить имунноферментный анализ (ИФА). Он определяет антитела к ВИЧ в крови человека, которые начинают вырабатываться через 1-3 месяца после заражения. Количественное определение анализ микроорганизмов необходимо для контроля лечения пациентов.

ПЦР для диагностики гепатитов

Вирусный гепатит С является тяжёлым заболеванием, которое может привести к развитию цирроза печени. В инкубационный период, который может составлять до 12 месяцев, вирус никак себя не проявляет, пациент практически не заразен, и вирус невозможно определить по обычному анализу крови.

Чаще всего, при несвоевременном лечении, заболевание переходит в хроническую форму и грозит множественными осложнениями.

При заражении гепатитом В, инкубационный период не так продолжителен и первые симптомы могут наблюдаться уже через 4 недели. Именно в этот период ИФА может показать присутствие вируса в организме.

Метод ПЦР позволяет:

выявить болезнь на этапе инкубационного развития;
разрешить сомнительные анализы других исследований;
оценить эффективность противовирусной терапии.

Отсутствие ДНК-вируса гепатита после проведённого лечения – признак его эффективности.

Анализ на туберкулез

Развитие туберкулёза провоцирует палочка Коха, которая может попасть в организм человека воздушно-капельным путём. Заболевание имеет две формы: скрытую и открытую. В первом случае инфицированный человек не является носителем инфекции и микобактерии в мокроте не выявляются даже при помощи ПЦР. Опасность эта форма всё же имеет, так как способна переходить в открытую стадию.

Открытая (активная) стадия представляет опасность для окружающих даже в случае строгого соблюдения правил личной гигиены. Для диагностики заболевания используют флюорографию, томографию и рентген грудной клетки. Также с этой целью применяют кожную туберкулированную пробу (пробу Манту). Но наиболее эффективным методом исследования является ПЦР.

В качестве исследуемых образцов используют:

кровь;
мокроту;
жидкость бронхов.

ПЦР для диагностики ВПЧ

Диагностика на ВПЧ проводится в случае наличия симптомов заболевания таких как, папилломы и бородавки в области половых органов. Также исследование назначается на этапе планирования беременности, в случае бесплодия, выкидышей, а также в ситуации заражения одного из партнёров, так как один из механизмов передачи вируса – половой.

Наиболее опасным является не само присутствия вируса в организме, а его тип. Некоторые его виды (16 и 18) являются высокоонкогенными и могут вызывать рак шейки матки у женщин. Метод ПЦР может назначаться совместно с другими видами исследования. Для анализа чаще всего используют мазок из половых органов. Кровь, моча и выделения из влагалища в качестве биоматериала используются крайне редко.

При герпесе

Этот тест диагностирует генитальную инфекцию вирусом простого герпеса 1 и 2 типа (HSV1 / HSV2). При положительном результате HSV2, следует пройти тест на ВИЧ и другие ЗППП. Для анализа требуется венозная кровь пациента.
Также может исследоваться моча, выделения и содержимое высыпаний при наличии симптомов.

Комплексное обследование ПЦР

В случае наличия показаний или же с целью профилактики заболеваний может быть назначен комплекс анализов методом ПЦР. Чаще всего инициатором выступает сам пациент, бывают случаи, когда комплексное обследование назначается для предотвращения вспышек определённых заболеваний в конкретном регионе.

ПЦР-12 – это комплексное исследование, которое охватывает следующие инфекции:

Гепатит.
Герпес.
ЗППП.
Туберкулёз.
Энцефалит.
Кандидоз.
Хеликобактерная инфекция.
Цитомегаловирус.
Мононуклеоз.
Онковирусы.
Листериоз.

Расшифровка анализа ПЦР

После проведения анализа методом ПЦР может быть озвучен положительный или отрицательный результат.

Результаты ПЦР диагностики выглядят вот так. Что это такое и как расшифровать расскажет врач

Точность ПЦР-диагностики

В большинстве случаев ПЦР диагностика предоставляет высокоточные результаты. Но в некоторых случаях для подтверждения правильности диагноза требуются дополнительные методы исследования.

Из-за чего может получиться ложный результат?

Ложноположительные результаты могут получиться в результате несоблюдения правил сбора анализа и проведения самой процедуры исследования.

Сам пациент может быть виновником ложной информативности в случае ненадлежащей подготовки к сдаче биоматериала. Оснащённость лаборатории и профессионализм врача непосредственно могут влиять на результаты исследования.

Где пройти ПЦР-диагностику

ПЦР диагностика производится в частных клиниках и лабораториях по назначениям врача или по инициативе самого пациента с целью профилактики.
Предпочтение следует отдавать клиникам и лабораториям с современным оборудованием, которые существуют не первый год на медицинском рынке и зарекомендовали себя.

ПЦР анализ: стоимость и сроки

Этот метод диагностики отличается высокой стоимостью. Его цена колеблется от 200 до 500 рублей за каждый вид. Комплексное обследование на наличие нескольких инфекций позволяет значительно сэкономить, по сравнению с оплатой каждого отдельного исследования.

Срок проведения исследования зависит от типа инфекции и может занять от 1 до 5 дней. Также эти показатели зависят от оснащённости лаборатории и квалификации медицинского работника.

ПЦР диагностика (о том, что это такое, подробно описано в данной статье) является наиболее точным и быстрым методом исследования. Она является одним из важнейших открытий в ХХ ст. в области медицины.

Благодаря этому методу стало возможным полное излечение от многих болезней. Но не стоит забывать о том, что ПЦР имеет и некоторые недостатки, и его эффективность иногда повышается совместно с использованием других методов исследования.

Оформление статьи: Владимир Великий

Видео про ПЦР диагностику

Про точность ПЦР:

В современной медицине проведение ПЦР анализа биологических жидкостей организма является высокоточным и информативным. При помощи данного анализа выявляют наличие в организме вирусных и микробных частиц, даже если болезни протекают скрыто и не дают никаких симптомов.

Что значит назначение вам ПЦР анализа? Эта аббревиатура расшифровывается как метод полимеразной цепной реакции - это особый способ проведения лабораторных исследований. При данном методе полученный от пациента биологический материал размещается в специальном аппарате. К исследуемой среде прибавляют набор ферментов-реактивов, которые помогают воспроизводить генетический материал возбудителя (вируса или микроба). При реакции воспроизводится большое количество копий ДНК или РНК, что позволяет идентифицировать путем сравнения с базой данных как вирусную, так и микробную инфекцию.

Что означает результат ПЦР анализа? Если в организме человека имеется возбудитель каких-либо инфекций, даже скрытый, при данном анализе будет выявлено не только его наличие, но и в каком количестве данная инфекция присутствует в теле.

Для анализа на инфекции методом ПЦР можно исследовать все биологические жидкости организма - кровь, моча, слюна, выделения половых органов, слизь горла и носа. Для анализа требуется совсем немного материала, так как если возбудители имеются, за счет воспроизведения их копий, концентрация генетической информации доводится до такой, которая выявит микроб или вирус, и определит его вид. Точность анализа ПЦР очень высока, при помощи данного анализа можно на сегодня определить практически все широко распространенные вирусные, микробные и иные инфекции.

Но, что же чаще всего выявляет анализ ПЦР? К списку инфекций, которые можно выявить данным методом можно отнести инфекционные, в том числе и социально опасные инфекции по типу туберкулеза или гепатитов В и С. Этим же методом можно выявить ВИЧ-инфекцию, хламидийную и уреаплазменную инфекции, микоплазмоз как респираторной системы, так и генитальный. При помощи данного анализа выявляют молочницу, бактериальный вагиноз, трихомониаз. Возможности данного метода позволяют выявлять скрытые инфекции - герпес разных типов, ВПЧ (папилломавирус), а также выявление особого микроба, ответственного за развития язв желудка - хеликобатера.

Сегодня сдать анализ методом ПЦР можно практически в любой частной или государственной лаборатории. Данные виды анализов проводят всем, детям и взрослым. В зависимости от того, какую цель преследует анализ, в зависимости от пола проводятся анализ разного биологического материала.

Так, анализ ПЦР у мужчин проводит по крови или моче, секрету уретры, слизи из глотки или носа, соку простаты или даже сперме. Проведение анализа ПЦР у женщин возможно в крови и моче, влагалищном секрете, выделениях из уретры, слизи носа и глотки.

Очень часто применяют анализ ПЦР при беременности, с его помощью во влагалищном секрете или крови выявляют скрытые инфекции, требующие особого наблюдения в этот период, а иногда и адекватного лечения.

ПЦР как берут анализ

Анализ на инфекции данным методом назначает врач, зачастую сбор материала проводится сразу в кабинете доктора - уролога или гинеколога. Как делается анализ ПЦР?

Исследуемый материал в лаборатории смешивают с реактивами и ждут реакции. При наличии возбудителей, копии их ДНК или РНК размножаются. Выявленные фрагменты генетического материала аппарат сравнивает с базами данных и точно выявляет возбудителя инфекции. Пи необходимости, также указывается и количество возбудителя в тех или иных жидкостях тела. Обычно исследование длится не более 1-2 суток, при необходимости - проводят экспресс-анализы.

Откуда берут анализ ПЦР? Это будет зависеть от того, какие виды возбудителя предполагаются. Если это ВИЧ или гепатиты - берется кровь, если это половые инфекции - берется мазок с уретры или влагалища. При подозрении на мононуклеоз или герпес берут мазок с горла. Также могут использоваться моча, спинномозговая жидкость, отделяемое из ран, мокрота и тд.

Анализ крови ПЦР

Для точных результатов и диагностики инфекций важно сдавать кровь в утренние часы натощак. Анализ крови методом ПЦР способен выявить возбудителей опасных заболеваний - ВИЧ, гепатиты, сифилис. В периоды обострения и активности вируса в крови могут быть выявлены вирусы герпеса, папилломы и некоторые другие.

ПЦР анализ: подготовка

Для абсолютной точности анализа важна правильная к нему подготовка. Проще всего подготовиться к анализу крови, никаких ограничений в диете или активности нет, кровь нужно сдать утром, натощак. Анализ мочи сдают после подмывания гениталий, из средней порции в специальный стерильный контейнер. Анализ ПЦР из половых путей заслуживает особого внимания, поэтому важно знать, как подготовиться. За сутки до обследования запрещается секс, перед исследованием рекомендовано не мочиться. При менструации у женщин, дата анализа переносится на 3-5 дней с момента последних выделений.

Сколько времени делается анализ ПЦР

Анализ в зависимости от возможности лаборатории может готовиться от нескольких часов до нескольких дней. В среднем, сколько дней делается анализ ПЦР? Обычно это одни -двое суток. При экстренной ситуации анализ может быть выполнен в этот же день, через несколько часов.